课件4蛙心灌流

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1、实验6离子和药物对蟾蜍心脏的影响—蛙心灌流心脏具有自动节律性。离体心脏用理化性质近似于血浆的生理溶液进行灌流，以保持其新陈代谢顺利进行，这种节律性可维持较长时间。心脏正常节律性活动有赖于内外环境的相对稳定，因此，改变灌流液成分，心脏的活动便会产生一定的变化。◆实验目的及意义心肌细胞生物电活动的基础是钠、钾、钙等跨膜离子流。◆实验目的及意义细胞外液中这些离子浓度的变化会对心脏的活动产生不同的影响。调节心脏活动的神经、体液因素对心脏活动的直接作用是神经递质或激素与心肌细胞相应受体结合，导致心脏活动的增强或减弱。交感神经兴奋时，

2、其末梢释放递质—去甲肾上腺素，作用于心肌细胞上的β受体，使心肌收缩力增强；迷走神经兴奋时，其末梢释放递质—乙酰胆碱，作用于心肌细胞膜上的M受体，对心肌细胞起抑制作用，使心肌的自律性降低。特异的受体阻断剂能阻断相应的递质与受体的相互作用。◆实验目的及意义学习离体蛙心的制备及其灌流方法。观察钙、钾等离子，异丙肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品、普萘洛尔等药物对心脏活动的影响。◆实验目的及意义◆实验对象与器材蟾蜍（雄性），两栖类手术器械，八木氏套管，蛙心灌流架，蛙心夹，万能滑轮，换能器，铁支架，蛙板林格溶液，4％CaCl2，4％KCl，

3、0.01％肾上腺素，0.01％乙酰胆碱（Ach），0.1%普萘洛尔，0.1%阿托品八木氏套管万能滑轮◆实验步骤离体蛙心的制备暴露心脏：取一只蟾蜍，双毁髓后背位固定于蛙板上。剪开胸腹部皮肤、肌肉，剪断左右乌喙骨和锁骨。将整个胸腔暴露。将胸腺、心包膜、动脉膜、肝系膜去除干净，辨认心脏结构及9条重要血管的位置。◆实验步骤离体蛙心的制备血管结扎：结扎右主动脉：在右主动脉下穿过两根线，分别结扎，中间剪断。①②总结扎线：左右肝静脉和左右肺静脉之间穿双线，其中一条线的一端自左主动脉下方，向动物胸腔左上方穿出，与另一端在动物胸腔左上方打一

4、个松结，将心室拉至胸腔右下侧，当心房收缩上提时于胸腔左上侧位置结扎。将两侧前腔静脉、左右肺静脉结扎在内，从结扎线以外剪断。注意远离静脉窦。③◆实验步骤离体蛙心的制备插管：左肝静脉插管：在左右肝静脉和后腔静脉下穿线，打一个松结，在左肝静脉远心端沿向心方向剪开一个楔形切口（大小约为管径的1/2），将装满灌流液的静脉插管（粗管）插入左肝静脉，见蛙心膨胀变白后结扎线扣。用灌流液将心脏内血液完全洗出。④左主动脉插管：在左主动脉弓下穿线，打一个松结，在动脉管壁远心端剪一个楔形切口（大小约为管径的1/2），插入动脉插管（细管），见有灌流

5、液流出后结扎线扣。注意动脉插管勿插入主动脉圆锥。⑤蟾蜍心脏示意图游离心脏：在左肝静脉和左主动脉结扎线外端剪断，并剪掉与心脏相连的其他组织，游离心脏。离体心脏安放：将离体心脏安放于蛙心灌流架上，调整灌流液液面及动脉插管出口的高度，使灌流液既能在心脏收缩时顺利搏出心脏，又能形成循环。◆实验步骤蛙心灌流装置A：动脉插管B：静脉插管*标本与仪器连接：用蛙心夹在心脏舒张期夹住心尖部，蛙心夹上的棉线通过万能滑轮转换后与张力换能器相连。◆实验步骤斯氏插管法斯氏插管法仪器连接◆实验步骤观察离子对心脏活动的影响：打开软件→选择实验（实验→循

6、环→蛙心灌流）→开始示波→开始记录→记录正常心搏曲线。向静脉插管内林格溶液中滴加4％CaCl22滴，观察心搏出现变化后立即将灌流液全部吸出，用新鲜林格溶液换洗2－3遍后，在静脉插管内注入新鲜林格溶液，使心脏恢复正常搏动；滴加4％CaCl26滴，观察心搏出现变化后立即换洗；滴加4％KCl1－2滴，观察心搏出现变化后立即换洗。正常心搏曲线↓4％CaCl2，2滴↓一旦出现现象立即换洗，2-3次↓正常心搏曲线↓4％CaCl2，6滴↓一旦出现现象立即换洗，2-3次↓正常心搏曲线↓4％KCl，1-2滴↓一旦出现现象立即换洗，2-3次↓

7、正常心搏曲线◆实验步骤观察离子对心脏活动的影响：◆实验步骤观察药物对心脏活动的影响：记录正常心搏曲线；滴加0.01%肾上腺素1滴，观察心搏情况，出现变化后立即换洗；滴加0.1%普萘洛尔1滴，约1分钟后滴加0.01%肾上腺素1滴，观察心搏变化，与前一步进行比较后，立即换洗；滴加0.01％乙酰胆碱1滴，观察心搏出现变化后立即换洗；滴加0.1%阿托品1滴，约1分钟后滴加0.01%乙酰胆碱1滴，观察心搏变化，与前一步进行比较后，立即换洗。注意：每次更换灌流液时，液面应保持一致。◆实验步骤观察药物对心脏活动的影响：正常心搏曲线↓0.

8、01%肾上腺素，1滴↓一旦出现现象立即换洗，2-3次↓正常心搏曲线↓0.1%普萘洛尔，1滴↓约1分钟后0.01%肾上腺素，1滴↓与前一步比较换洗，2-3次↓正常心搏曲线正常心搏曲线↓0.01％乙酰胆碱，1滴↓一旦出现现象立即换洗，2-3次↓正常心搏曲线↓0.1%阿托品，1滴↓约1分钟后0.01%乙酰胆碱