离体蛙心灌 离体蛙心灌流 离体蛙心灌流.doc

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1、机能学实验课教案离体蛙心灌流生理教研室：卢娜2004-9-20新乡医学院实验课教案首页课程名称：机能实验学授课教师姓名及职称：卢娜一、题目离体蛙心灌流二、对象2002级本科各个专业三、单元教学目标与课时分配1.理论讲解1学时:40min2.学生操作4学时:160min共:200min四、授课重点心肌细胞的生理特征五、授课难点1.学习离体蛙心灌流的实验方法。2．观察Na、K、Ca三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。六、授课形式小班实验课七、授课方法与课前准备认真备课；采用启发式教学；了解学生已学课程，医学生物学、生物化学，同期课程生理学内容围绕

2、重点、难点，深入浅出八、教材与参考文献《生理学实验方法》李东亮主编《生理学实验指导》朱思明主编《医用机能实验学》常全忠主编《病理生理学》第五版《病理生理学实验》孙银平主编《药理学》第五版九、思考题1．给人体快速静脉注射钾离子，会有什么样的结果?2．蛙心插管内灌流液是心脏的什么负荷?3．正常体内肾上腺素、乙酰胆碱等化学物质来自何处?十、教研室审查意见主任签字新乡医学院生理学教研室2004年9月20日离体蛙心灌流[实验目的]1．学习离体蛙心灌流的实验方法。2．观察Na、K、Ca三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。[实验原理]1．心脏的正常节律性活

3、动需要一个适宜的内环境，内环境的变化直接影响着心脏的正常活动。本实验在蛙心的灌流液内人为地加入一些物质而改变心脏活动的内环境，观察心脏活动有何变化。2．心肌细胞分类收缩性兴奋性传导性自律性非自律细胞，心房肌，心室肌细胞有有有无自律细胞，p细胞，浦肯野细胞无有有有快反应细胞：心房肌，心室肌，浦肯野细胞：主要由快钠通道被激活，Na快速内流引发动作电位，去极速度快慢反应细胞：窦房结细胞，房室交界区细胞：主要由慢钙通道被激活，Ca内流引发动作电位，去极速度慢3．心肌细胞的生理特征：电生理特征：自律性，兴奋性，传导性机械生理特征：收缩性影响心肌细胞电生理因素影响心肌细

4、胞兴奋性因素（心室肌细胞）影响心肌细胞自律性因素（窦房结细胞）影响心肌细胞传导性因素（房室交界区细胞）静息电位水平与阈电位水平之间的差距4期自动除极的速度结构因素：直径钠通道状态最大复极电位水平与阈电位水平之间差距动作电位0期去极速度和幅度邻近部位膜的兴奋性心肌细胞兴奋－收缩耦联过程所需的Ca要从细胞外液转运，细胞兴奋时，膜上Ca通道开放，因此：细胞外液Ca浓度↑――细胞兴奋时内流Ca↑――心肌收缩力↑反之亦然４．1％KCl：即１３４ｍｍｏｌ/L（正常：４ｍｍｏｌ／Ｌ）轻，中度高钾：细胞外K↑――Ｋ与Ｃａ在细胞膜上有竞争性抑制――Ｋ抑制细胞膜对Ｃa转运――进

5、入细胞内Ca↓――心肌的兴奋收缩联过程减弱――心肌收缩力↓[K]↑――膜内外ｋ浓度梯度减小――静息电位绝对值减小――兴奋性↑[K]↑――细胞膜对k通透性增加――K通道失活V↓――自动去极化V↓――自律性↓[K]↑――细胞膜对k通透性增加――K外流增加――最大复极电位↑――自律性↓[K]↑――Ca内流受抑制――0期去极速度和幅度降低――传导性降低重度高钾：[K]↑↑――RP↓――Ｎａ通道失活――兴奋性丧失５．2％CaCl2：　即１８０ｍｍｏｌ/L（正常：２ｍｍｏｌ／Ｌ）细胞膜外Ｎａ与Ｃａ有竞争性抑制细胞外液Ca浓度↑――细胞兴奋时内流Ca↑――心肌收缩力↑快反

6、应细胞：高Ｃａ――Ｎａ内流抑制――０期去极化速度及幅度下降――传导性↓慢反应细胞：高Ｃａ――Ca易进入细胞，Ｃａ内流增加――０期去极化速度增加――传导性↑　６．　O.65％NaCl　：　１１１ｍｍｏｌ／Ｌ细胞外Ca↓――2期内流Ca↓――胞浆Ca浓度↓――心肌收缩↓[Ｃａ]↓――Ｃａ内流减少――０期去极化速度减慢――传导性↓　[Ca]↓――Ca不易进入细胞――4期自动除极的速度减慢――自律性↓7：肾上腺素正性变化肾上腺素与心肌细胞膜上的β1受体结合――心肌细胞和肌浆网膜Ca通透性↑――肌浆中Ca浓度增加――心肌收缩↑使K通道，Ｎａ通道，Ca通道都开放，---

7、---慢Ca通道-----8：乙酰胆碱负性变化乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合――心肌细胞膜K通道的通透性↑――促k外流――1：窦房结细胞复极时K外流↑――最大复极电位水平↑――自律性↓2：复极时K外流↑――AP2,3期缩短――Ca进入细胞内↓――心肌收缩↓乙酰胆碱可直接抑制Ca通道――Ca内流↓――心肌收缩↓[实验对象]青蛙或蟾蜍[实验器材和药品]1．器材生物信号采集系统、机械换能器、蛙类手术器械1套、蛙心插管、蛙心夹、试管夹、双凹夹、万能支架、滴管、150ml小烧杯4个、任氏液。2．药品O.65％氯化钠、2％氯化钙、1％氯化钾、1：10000肾上腺素、

8、1，10000乙酰胆碱等。[实验步骤]1离体蛙心的制