芮勇宇2011-3-14临床细菌学检验

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1、临床细菌学检验芮勇宇南方医科大学南方医院检验科/检验系1医学博士、博士后，主任技师（正高）、副研究员，硕士导师，支部书记；南方医院检验科《临床微生物检验室》主任；南方医院检验系《临床微生物学教研室》主任；办公室61642145，手机13729852982，Email:yongyurui@tom.com2第一部分：标本分类、每一类标本采集注意事项、涂片及鉴定结果解读；第二部分：药敏结果解读；第三部分：难鉴定细菌真菌分子鉴定新技术。3细菌标本类别标本明细容器1静脉血静脉血、骨髓血液培养瓶2中段尿无菌尿杯条码

2、开头203粪便灰色头短管粪便容器4痰液无菌痰盒抽吸痰专用痰盒，手工贴条码条码开头205咽拭子无菌拭子管条码开头204细菌标本类别标本明细容器6穿刺液（说明标本部位）6.1胸水、腹水、关节腔液、引流液，脑脊液，深部脓液、腹透液等各部位穿刺液无菌拭子管（胸腹水、关节腔液、引流液等需加肝素抗凝）或直接将注射器送检，手工贴条码条码开头205细菌标本类别标本明细容器7分泌物（说明标本部位）7.1前列腺液、尿道、阴道、宫颈口等生殖道分泌物无菌拭子管条码开头207.2伤口分泌物无菌拭子管条码开头207.3各部位组织块

3、无菌拭子管条码开头207.4气管、食道等部位刷片刷片盒6细菌标本类别标本明细容器8器械8.1气管插管无菌拭子管条码开头208.2动静脉插管、各部位引流管无菌拭子管条码开头208.3各种输液反应液体，医院感染监测物品的无菌试验直接送检相应物品8.4空气监测，物表监测，医护人员手培养到细菌室取培养皿或含培养液的无菌试管7一、血液标本病原菌检验8目前我国社会老龄化日趋严重，慢性病及恶性肿瘤、器官移植、爱滋病和结核病病人不断增多，侵袭性诊疗技术广泛应用，败血症发病率不断增加。败血症病死率30%以上；早期病原学诊

4、断和合理抗生素治疗，明显降低败血症病死率。9血液培养的送检指征：发热>38℃或低温<36℃；白细胞增多>10×109/L，“核左移”白细胞增多；粒细胞减少，成熟的多核白细胞<1×109/L；血小板减少；皮肤粘膜出血；心率>90次/分；呼吸频率>20次/分；二氧化碳分压<32mmHg；昏迷；多器官衰竭。10最好在抗生素使用前采集，若已用抗菌药须，则尽量避开血药浓度的高峰期；建议第一次可在病人发热初期或高峰期采集，根据病人发热情况，在24h内再取2-3份标本，以提高病原菌检出率。血液标本采集的注意事项：11

5、12标准血培养瓶（蓝色帽）：帽子和标签纸左上方为蓝色，“Standard10Aerobic/F”，用于成人需氧菌和真菌培养，血液量3-10ml，8-10ml最佳。13中和抗生素的树脂瓶（灰色帽）：帽子和标签纸左上方为灰色，“PLUS+Aerobic/F”，血液量3-10ml，8-10ml最佳。14厌氧瓶（黄色或橘红色帽）：帽子和标签纸左上方为黄色，“StandardAnaerobic/F”，血液量3-7ml，5-7ml最佳。15中和抗生素的儿童瓶（粉红色帽）：帽子和标签纸左上方为粉红色，“PEDSPLU

6、S/F”,血液量1-3ml。16采集标本前先开申请单，到检验科细菌室或门诊领取血培养瓶；采血前先在培养瓶标签纸左侧空白处（箭头所指处）填写抽血时间和病人科别、床号和姓名；不要在培养瓶条形码上涂写，以免影响扫描。17将标签纸上条形码右侧部分（含数字）撕下贴于检查申请单上；而其它标本均是将申请单上双联号码撕下贴于标本上。18注射器采血后，将血培养瓶帽子揭下，橡皮由金属皮（围脖）固定于瓶上；将橡皮塞用70%酒精消毒，注射器针头刺穿橡皮塞将血注入培养瓶内；橡皮塞裸露即可。19细菌室接到已采集血液的培养瓶后，立即

7、放入自动血液培养检测仪，自动培养及实时检测。20阳性初步结果报告：仪器阳性报警，90%以上阳性标本24h内检出；取出阳性瓶，对血液涂片及革兰氏染色；立即将涂片结果（G+、G-细菌，球菌或杆菌，或真菌）电话通知相应科室，并在网上发出；利用阳性血液进行K-B法药敏试验，第二天将初步药敏结果电话通知相应科室。结果报告形式21血液涂片22血液涂片23血液涂片24血液涂片25血液涂片26血液涂片27阳性最终结果报告：将阳性血液接种血平板培养细菌；第二天将血平板上生长的细菌鉴定及MIC法药敏试验；第三天发鉴定及MI

8、C法药敏结果的正式报告。阴性结果报告：如培养5天仍为阴性，再接种血平板培养一天，核实为阴性后再发报告。结果报告形式28二、中段尿标本病原菌检验29检测泌尿系统感染；一般进行细菌和真菌培养、菌落计数和药敏；也可离心后对沉渣进行涂片检查，革兰染色或抗酸染色；也可用于淋球菌培养和涂片检查。目的和意义30最常采集中段尿，晨起第一次尿送检最佳；先用肥皂水、或1：1000高锰酸钾水溶液冲洗女性外阴部及尿道口或男性尿道口，再用灭菌水清洗，最后用灭菌纱布檫