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时间:2019-06-08
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1、食用菌栽培技术滁州职业技术学院生化工程系汤士勇:tangshiyong_tsy@163.com:570424862第二章食用菌菌种生产菌种生产类型及生产流程菌种生产的基本设备培养基的配制消毒与灭菌接种与培养菌种的分离方法菌种的保藏与复壮液体菌种生产本章主要内容一、菌种的生产类型及生产流程菌种:是指以适宜的营养培养基为载体进行纯培养的菌丝体,也就是培养基质和菌丝体的联合体。或者说是指人工培养,并供进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。菌种的生产类型:食用菌菌种是通过三级逐步扩大培养的方式来生产的,在生产上通常把
2、菌种分为一级菌种(母种)、二级菌种(原种)和三级菌种(栽培种)。一、菌种的生产类型及生产流程菌种一级菌种二级菌种三级菌种从孢子分离培养或组织分离培养获得的纯菌丝体。由一级菌种扩大繁殖成的菌丝体。由二级菌种扩大繁殖成的菌丝体,是直接用于栽培的菌种。一、菌种的生产类型及生产流程母种一、菌种的生产类型及生产流程原种一、菌种的生产类型及生产流程栽培种一、菌种的生产类型及生产流程三级菌种之间的关系菌种类型制种容器培养基菌株来源用途要求一级菌种(母种、试管种)试管PDA、PSA种菇(孢子或菌肉组织)扩制二级种菌种
3、保藏纯度高,质量好,绝对无杂菌二级菌种(原种)菌种瓶固体培养基一级菌种扩制三级菌种纯度高,质量好,无杂菌三级菌种(栽培种)罐头瓶、菌种袋固体培养基二级菌种用于栽培高纯度,高质量,无杂菌一、菌种的生产类型及生产流程菌种生产流程:种菇一级菌种二级菌种三级菌种栽培一、菌种的生产类型及生产流程菌种生产工艺流程:三级种培养基制备高压或常压灭菌接种三级菌种栽培培养斜面一级种培养基制备高压灭菌接种培养筛选提纯原始种中试后确定一级种保存孢子或组织分离一级种转管、扩大菌种瓶二级种培养基制备高压灭菌接种培养二级菌种罐头瓶
4、菌种袋一、菌种的生产类型及生产流程菌种制作的四个基本环节配制培养基灭菌接种培养二、菌种生产的基本设备菌种厂的布局仓库配料室灭菌室接种室培养室办公室栽培棚门口晒料场二、菌种生产的基本设备接种设备接种室缓冲间:2~3m2接种间:5~6m2面积7~9m2高2.2~2.5m要求6个面平滑两门错开、平拉式顶装紫外灯二、菌种生产的基本设备接种设备接种室清洁→物品放缓冲间→消毒→移物至接种间→喷消毒液→10min后接种→消毒液清洁使用二、菌种生产的基本设备接种设备接种室二、菌种生产的基本设备接种箱观察窗紫外灯操
5、作孔二、菌种生产的基本设备超净工作台(净化工作台)二、菌种生产的基本设备超净工作台(净化工作台)双人单人二、菌种生产的基本设备接种工具要求:前端为导热性好的金属材料二、菌种生产的基本设备培养设备培养室:培养大量菌种的恒温房要求光线暗;密闭好、通风性强;能升温、降温(空调机);有培养架二、菌种生产的基本设备培养室:培养大量菌种的恒温房二、菌种生产的基本设备培养箱培养少量菌种的恒温电器(20~40℃)二、菌种生产的基本设备灭菌设备手提式高压灭菌锅高压锅外锅:装水内锅:装物锅盖安全阀排气阀压力表三
6、、培养基的配制培养基概念:采用人工的方法,按照一定比例配制各种营养物质,以供给食用菌生长繁殖的基质。要求:含有该菌生长发育所需要的营养物质;水分、pH适宜;必须经过严格的灭菌,保持无菌状态。三、培养基的配制培养基种类类型天然:天然有机物合成:已知成分的化学药品半合成:原料来源状态液体:营养液固体固体:天然固体原料固化:加1.5%~2%琼脂表面形状斜面培养基平板培养基三、培养基的配制培养基成分:水分碳源:单糖、双糖、多糖氮源:有机氮(氨基酸、蛋白质、尿素)、铵态氮(硫酸铵)无机盐:磷、钾、钙、
7、镁、硫等。磷酸氢二钾对pH变化具有缓冲作用生长素:B族维生素凝固剂:琼脂三、培养基的配制粉状条状属天然植物多糖融点96℃以上凝点40℃以下冷水中不溶透明度好、粘着力强不被微生物分解利用琼脂三、培养基的配制三、培养基的配制母种培养基PDA培养基和PSA培养基是一级菌种最常用的培养基,适用于大部分食用菌菌种的分离、培养和保藏,既是一种广泛培养基,也是一种基础培养基。PDA培养基PSA培养基马铃薯(去皮)200g马铃薯(去皮)200g葡萄糖20g蔗糖20g琼脂18~20g琼脂18~20g水1000m
8、l水1000ml三、培养基的配制母种培养基配制过程煮沸20min,取定量滤液制马铃薯滤液滤液沸时加入,融后加余料融化琼脂调节pH值勿污管口,控制装量分装试管准备灭菌包扎成捆1%NaOH或HCl三、培养基的配制母种培养基配制过程三、培养基的配制原种、栽培种培养基棉籽壳培养基主料棉籽壳87,麦麸10辅料白糖1,石灰1,过磷酸钙1棉壳、麦麸干混余料溶于水后浇入主料清水翻拌至含水量配制三、培养基的配制原种、栽培种培养基谷粒培养基主料麦粒、玉米粒等98.5%
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