大豆蛋白酶抑制剂的提取及其性质研究[1]

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1、第27卷第6期大豆科学V01．27No．62008芷12月SOYBEANSCIENCEDec．20o8大豆蛋白酶抑制剂的提取及其性质研究田军，魏志魁，周先碗(高等教育出版社，北京100029；北京大学生命科学学院，北京100871)摘要：蛋白酶抑制剂(ProteaseInhibitor)是～类对蛋白酶有抑制作用的多肽或蛋白质，对于生物体内许多重要的生理功能具有调节作用。蛋白酶抑制剂广泛存在于动、植物和微生物中，在豆类植物的储藏器官，特别是种子中含量丰富。在大豆种子中其含量可达总蛋白的6％一8％。且

2、大豆中蛋白酶抑制剂的活性最高。探讨从大豆中提取、分离蛋白酶抑制剂的方法，并对其性质进行初步研究。首先将大豆浸泡液分别通过阴离子和阳离子交换柱层析分离，对获得的各组分进行活性测定、SDS-凝胶电泳和等电聚焦电泳分析。结果显示：最高的组分比活在15000U·mg左右、相对分子质量在21000D左右、等电点在4．55左右。关键词：大豆；胰蛋白酶抑制剂；等电聚焦电泳中图分类号：s565．1文献标识码：A文章编号：1000—9841(2008)06—108504ExtractionandCharacteri

3、zationofSoybeanTrypsinInhibitorTIANJun，WEIZhi—kui，ZHOUXian—wan(‘HigherEducationPress，Beijing100029；CollegeofLifeSciences，PekingUniversity，Beijing100871)Abstract：Pmte~einhibitorisakindofpolypeptidesorproteinswhichhasinhibitionefectonpmteaseanditshighes

4、tinhi—bitionactivitywasobservedintheseedofsoybean．ThesoybeantrypsininhibitorswereextractedandpurifiedbyDEAE-Sepharose4BFFandSP—Sepharose4BFFcolumn，andtheactivitiesofeachobtainedcomponentweremeasured．Mean—while，SDS—PAGEandisoelectricfocusingelectrophor

5、esiswerealsousedtodeterminetherelativemolecularweightandiso-electricpoint．Resultshowedthecomponentwiththehighestinhibitionactivityhasthespecificinhibitionactivityof15000U·mg～，theM，of21000andtheisoelectriepointof4．55．Keywords：Soybean；Trypsininhibitor；I

6、soelectricfocusingelectrophoresis蛋白酶抑制剂(ProteaseInhibitor)广泛存在于beanTrypsinInhibitor，简称BBI)。动、植物和微生物中，是一类对蛋白酶有抑制作用的蛋白酶抑制剂有着重要的生理、生化功能和广多肽或蛋白质，能与相应的蛋白水解酶形成一定的泛的应用。研究表明蛋白酶抑制剂具有抗某些病虫动态平衡，调节生物体内许多重要的生命活动J。害的天然防御功能，能削弱或阻断昆虫消化道内的根据其来源不同抑制的蛋白酶有所区别，从大豆中蛋白酶对食物蛋

7、白质的消化作用而使昆虫非正常发提取的大豆胰蛋白酶抑制剂(SoybeanTrypsinInhib—育或死亡。生物体内许多重要的生理过程都受itor，STI)等。在豆类植物的储藏器官，特别是种子蛋白酶及其抑制剂的调控，在临床医学的诊断、治疗中含有丰富的胰蛋白酶抑制剂J，例如大豆和绿豆和预防等方面，蛋白酶抑制剂作为新型药物显示出种子中胰蛋白酶抑制剂的含量可达总蛋白的6％一了广阔的应用前景。8％。在不同作物种子中，胰蛋白酶抑制剂的活性各1材料和方法不相同，通常以大豆中胰蛋白酶抑制剂的活性最高J。但是迄今为

8、止，只有2种大豆胰蛋白酶抑制1．1材料剂得到较详细的研究。分别是库尼兹胰蛋白抑大豆(soybean)(购自超市)；阴离子交换层析介制剂(KunitzSoybeanTrypsin!nhibitor，简称KSTI)和质DEAE—Sepharose4BFF，阳离子交换层析介质sP—鲍曼一贝尔克胰蛋白酶抑制剂(Bowman．BirkSoy—Sepharose4BFF(Pharmacia)。丙烯酰胺和甲叉双丙收稿日期：2008．04—08作者简介：田军，女(1966-)，在读硕士，副编审。E