改良的黄嘌呤氧化酶法测定动植物组织中SOD比活力

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1、※分析检测食品科学2011,Vol.32,No.06237改良的黄嘌呤氧化酶法测定动植物组织中SOD比活力徐东，赵建，黄汉昌，文镜*(北京联合大学生物活性物质与功能食品北京市重点实验室，北京100191)摘要：针对黄嘌呤氧化酶法测定动植物组织中SOD活力存在干扰的问题，对方法加以改良。以使SOD变性而不影响干扰物质的干扰值为原则，通过测定酶活力及圆二色光谱寻找制备样品空白的最佳实验条件，设计经过加热的样品空白；利用扣除法排除样品中其他物质对黄嘌呤氧化酶体系的干扰；通过加标回收实验以及对动植物组织的实测，对改良前后的测定结果进行比较。结果表明：用改良的黄嘌呤氧化酶法

2、可使动植物组织中SOD活力的检测结果更准确。关键词：黄嘌呤氧化酶法；样品空白；检测超氧化物歧化酶活力DeterminationofSODSpecificActivityinAnimalandPlantTissuesbyImprovedXanthineOxidaseMethodXUDong，ZHAOJian，HUANGHan-chang，WENJing*(BeijingKeyLaboratoryofBioactiveSubstancesandFunctionalFoods,BeijingUnionUniversity,Beijing100191,China)Abst

3、ract：Inordertominimizetheinterferenceinxanthineoxidasemethodforthedeterminationofsuperoxidedismutase(SOD)activityinanimalandplanttissues,thexanthineoxidasemethodwasmodified.Theoptimalexperimentalconditionsforpreparingbanksampleswereexploredbymeasuringtheactivityandcirculardichroismspe

4、ctrumofSOD.Aheatedsamplewasdesignedastheexperimentalblank.Subtractionrulewasusedtoeliminatetheinterferenceofothersubstancesinxanthineoxidasesystem.StandardadditionrecoveryexperimentsandactualdeterminationofSODactivityinanimalandplanttissueswereusedtocomparethemethodwithandwithoutmodif

5、ication.ResultsindicatedthattheimprovedxanthineoxidasemethodcouldresultinmoreaccuratedeterminationofSODactivityinanimalandplanttissues.Keywords：xanthineoxidasemethod；sampleblank；SODactivitydetermination中图分类号：TS207.3文献标识码：A文章编号：1002-6630(2011)06-0237-05超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内能够清除超氧阴离离子自由基的清除

6、率定义为酶的活力单位[6]。其检测的子自由基的预防型抗氧化剂[1]，在动植物体内广泛存基本原理是在反应体系中先产生超氧阴离子自由基，超在，因其具有抗衰老、提高机体对多种疾病的抵抗力，氧阴离子自由基作用于某种化合物最终使之产生颜色反增强机体对外界环境的适应力，减轻肿瘤患者在放疗、应即对一定波长光的特异吸收，用分光光度计测定其吸化疗过程中的毒副作用等生理功能，已作为一种抗氧化光度。而当反应体系中加入待测SOD后，由于SOD的功能因子用于临床、食品、化妆品等领域[2-4]。目前，作用使应体系中超氧阴离子自由基数量减少，分光光度动、植物中SOD活性的测定方法有很多，主要包

7、括邻计测定的吸光度减少。根据这两个吸光度值可以计算反苯三酚法、化学发光法、NBT还原法及黄嘌呤氧化酶应体系中加入的SOD对超氧阴离子自由基的清除率从而法等[5]。其中黄嘌呤氧化酶法是目前应用最广泛的测定计算出SOD的活力和比活力[7]。最初设计者设计这种方SOD活性的方法，该方法以对反应体系中产生的超氧阴法的目的是测定SOD样品的活性，从实验原理到具体操收稿日期：2010-04-19基金项目：北京市教委重点实验室引导基金项目(21202543503)作者简介：徐东(1985—)，男，助理工程师，学士，主要从事保健食品功能评价研究。E-mail：xudong7879

8、@sohu