人脑胶质瘤多药耐药细胞株的 构建及生物学特性鉴定

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1、窑764窑中华神经医学杂志2011年8月第10卷第8期ChinJNeuromed,August2011,Vol.10,No.8窑基础研究窑人脑胶质瘤多药耐药细胞株的构建及生物学特性鉴定白义凤廖红展刘天助郭洪波揖摘要铱目的体外构建胶质瘤耐甲磺酸伊玛替尼多药耐药细胞株袁并研究其生物学特性遥方法采用逐渐增加培养基中伊玛替尼药物浓度的方法诱导构建耐甲磺酸伊玛替尼的人脑胶质瘤U251细胞株(命名为U251AR)曰CCK8法检测U251AR尧U251对多种化疗药物的IC50和耐药指数曰QRT-PCR法检测耐药相关基因ABCC1尧ABC

2、B1尧ABCB4尧ABCG2mRNA的表达袁流式细胞术检测ABCG2蛋白的表达遥结果体外培养12个月后建立了稳定耐药的细胞株U251AR袁与亲代细胞相比异形性不显著遥U251和U251AR对化疗药物的IC50相比较差异均有统计学意义(P<0.05)袁U251AR对甲磺酸伊玛替尼尧阿霉素尧顺铂的耐药指数分别为20.41尧5.06尧10.28袁表现出多药耐药特征遥QRT-PCR检测结果显示耐药细胞株U251AR中ABCC1尧ABCB1尧ABCB4尧ABCG2mRNA的表达明显高于亲代U251细胞袁流式细胞术检测结果显示U251

3、AR中ABCG2蛋白的表达强于亲代U251细胞袁差异均有统计学意义(P<0.05)遥结论成功建立多药耐药的胶质瘤细胞株U251AR袁其多药耐药与ABCC1尧ABCB1尧ABCB4尧ABCG2mRNA及ABCG2蛋白的表达上调相关遥揖关键词铱神经胶质瘤曰甲磺酸伊玛替尼曰多药耐药性曰细胞株揖中图分类号铱R730.264揖文献标志码铱A揖文章编号铱1671-8925(2011)08-764-04Establishmentofhumanglioblastomamultiformmultidrugresistantcelllinei

4、nvitroandidentificationofitsbiologicalcharacteristicsBAIYi-feng*,LIAOHong-zhan,LIUTian-zhu,GUOHong-bo.*DepartmentofOncology,ZhujiangHospital,SouthernMedicalUniversity,Guangzhou510282,ChinaCorrespondingauthor:GUOHong-bo,Email:hongboguo158@126.com揖Abstract铱Objective

5、Toestablishtheimatinib(STI-571)-resistantsublineinvitroandinvestigateitsbiologicalcharacteristics.MethodsHumanglioblastomamultiformdrug-resistantcellline(namedU251AR)wasestablishedinvitrobysuccessivelyincreasingtheconcentrationofimatinibinacellculturemedium.The50%

6、inhibitorydose(IC50)valuesandtheresistanceindexes([IC50U251/STI-571]/[IC50U251])forotherchemotherapeuticagentswereevaluatedusingcellcountingkit-8assays.ExpressionsofacquiredmultidrugresistanceP-glycoprotein(MDR1,ABCB1;MDR3,ABCB4),breastcancerresistanceprotein(BCRP

7、,ABCG2)andmultidrugresistance-associatedprotein1(MRP1,ABCC1)weredetectedbyQRT-PCR.FlowcytometrywasemployedtodetecttheproteinexpressionofABCG2.ResultsTheU251ARwasdevelopedafterculturefor12monthsandsimilarmorphologiesofU251andU251/STI-571cellsweredetermined.Theresis

8、tancecoefficientofU251ARcellstoimatinibwas20.41timesmorethanthatoftheparentcells,andU251ARcellsshowedcross-resistancetomanyanti-tumoragents(P<0.05).Ther

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