蛋白激酶cα介导人神经胶质瘤细胞株多药耐药机制的研究

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1、蛋白激酶Cα介导人神经胶质瘤细胞株多药耐药机制的研究陈晋1，程远1，万敬员2（重庆医科大学:1附属第二医院神经外科，重庆400010,2药理教研室，重庆400016）摘要：目的探讨蛋白激酶Cα（ProteinkinaseCα,PKCα）在人神经胶质瘤细胞株SHG44发生多药耐药过程中的作用和机制。方法应用阿霉素浓度递增和间歇诱导法建立SHG44/ADM耐药株,采用PKCα激活剂PMA和抑制剂Staurosporine分别干预SHG44/WT和SHG44/ADM细胞株，免疫印迹法检测PKCα和MDR-1的表达量，激酶分析PKCα活性,

2、荧光分光光度计检测细胞内阿霉素浓度。结果PKCα激活剂PMA增强细胞PKCα活性，同时增加MDR-1表达和活性；PKCα抑制剂Staurosporine抑制细胞PKCα活性，减少MDR-1表达和活性。结论PKCα通过MDR-1参与神经胶质瘤细胞的多药耐药。关键词：神经胶质瘤；蛋白激酶Cα；多药耐药StudyonthemechanismofproteinkinaseCαmediatedmultidrugresistanceinhumangliomaSHG44celllineCHENJin1,CHENGYuan1,WANJingYuan

3、2.（1DepartmentofNeurosurgery,AffiliatedSecondHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing400010；2Departmentofpharmacology，ChongqingMedicalUniversity，Chongqing400016,China）Abstract：Objective:TounderstandthemolecularmechanismandeffectofproteinkinaseCαonmultidrugresista

4、nceofhumangliomaSHG44cellline.Methods:StepwiseconcentrationincreasingandintermittentadministrationmethodwasusedtoconstructSHG44/ADM,thePKCαreactivatorPMAandthePKCαinhibitorStaurosporinewereusedtotreatSHG44/WTandSHG44/ADM,theexpressionofPKCαandMDR-1weredetectedbywestern

5、blotting,thePKCαactivitywasassayedbykinase,ADMaccumulationwasdeterminedusingfluorescencespectrometry.Results:PMAincreasePKCαactivityandMDR-1proteinexpressionandactivity.StaurosporinewasabletoblockPKCαactivityanddecreaseMDR-1expressionandactivity.Conclusion:PKCαmediated

6、mutildrugresistancebyMDR-1expressionandactivity.keywords：glioma;proteinkinaseCα;multildrugresistance神经胶质瘤化疗失败的重要原因之一是多药耐药（multipledrugresistance,MDR）[1-3]，而mdr-1基因编码的蛋白MDR-1（P-gp170）表达与激活是介导多种耐药的主要因素[4]。尽管人们对MDR-1表达与激活的原因进行了大量的研究，但其确切的分子机制仍不清楚。近年来一系列的研究表明，蛋白激酶C（Protein

7、kinaseC,PKC）参与肿瘤的发生、发展及预后[5]，因作者简介:陈晋，男，重庆大足人，博士，主治医师，讲师，主要从事神经胶质瘤的化疗研究。电话：（023）63693539，E-mail:dazushike@163.com7通讯作者：程远，电话：（023）63693542，Email:chengyuan023@yahoo.com.cn因此，本研究以人神经胶质瘤细胞株SHG44/WT野生型和建立的SHG44/ADM耐药型为模型，观察PKCα与MDR-1的相互关系，进一步探讨PKCα对神经胶质瘤细胞耐药的影响。作者简介:陈晋，男，重

8、庆市人，博士，主治医师，讲师，主要从事神经胶质瘤的化疗研究。电话：（023）63693539，E-mail:dazushike@163.com通信作者：程远，电话：（023）63693542，E-mail:chengyuan023@y