猪嗜血杆菌胸膜肺炎血清学研究初报_试管凝集反应

猪嗜血杆菌胸膜肺炎血清学研究初报_试管凝集反应

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1、‘猪_嗜血杆菌胸膜肺炎血清学研究初报一试管凝集反应朱士盛蔡卫端李并玉杜华宏二农牧渔业部动物检痊所)猪的嗜l自1杆菌胸膜肺炎是由胸膜肺炎嗜血杆菌(HaemopliilusPleuropneum、iae,·acus以下简称HP)即付溶血嗜血杆菌(HParhaemolyti)所引起的一种伴有胸膜。。,炎的出血性坏死性肺炎本病多呈最急性或急性病程而迅速致死为此许多研究者将本“”、“”“”。、病的流行性质描述为瘟疫式跳跃式以及闪电式本病的发生与猪的年龄,。r。性别无关为高度接触性传染病其发病率和死亡率都在50呱以上(Be1974

2、)最急‘sen。,、性型的死亡率高达80一10肠(Niel1985)近年来欧洲美洲以及亚洲的许多国。。:,家都有关于本病的报道本病能引起养猪业的严重损失如美国衣阿华州每年因本。病所造成的经济损失达数百万美元目前猪的胸膜肺炎嗜血杆菌的九个血清型己被确,,。定而我国除台湾省外对本病尚无研究和报道。,·ce试管凝集反应为HP的血清学定型和血清学诊断方法之一早在1971年JNiolt、、·应用凝集试验和交叉吸附试验区别了HP血情型123;AGunarsson等人于1977、。,a。年1978年报道了用试管凝集试验区别了血清型l

3、一5198。年日本KoshiYmamot,·sen等人以及1984年丹麦RNiel都报道了试管凝集反应的抗体滴度)l:20者为阳。,。性朝鲜的研究者也曾报道过应用试管凝集反应来诊断本病而加拿大的Mitle等人,,。曾报道说除HP二型外常规的试管凝集试验能出现非特异性反应本文主要介绍了H:。3。:P二型参考株S和丹麦二型株(简写为HP)所制备的兔高免血清作试管凝集反应。,的特异性另收集我国猪血清5份(猪瘟阳性血清1份萎鼻血清2份)均呈现阴性反。应(<1:2。)材料和方法:菌株·。P二型株S:。。。,Joolet参考株H系

4、瑞士伯恩大学兽医细菌研究所Ni教授惠赠Z,。丹麦HP株系丹麦国家兽医血清实验室提供:杭原,:用于兔的高免抗原是在巧克力琼脂平板上生长18小时培养物制得的(10肠CO。.一,3,4℃10000条件「37℃温箱内培养)将生长物收集在含。务福尔马林盐水中在下以.。r,,pm离心幼分钟洗两次然后悬浮于03肠福尔马林盐水中用于试管凝集反应的抗原浓·。,.onnarsson调节54Om卜,。6,度按G法测得用10毫米直径的比色杯到波长时吸收位为。。该浓度即为试管凝集试验用的抗原浓度高免用的执原浓度含量为smg千菌重/ml杭血清:及

5、待检猪血清.用0sml,,两周后,抗原悬液与等量完全费氏佐剂混合给兔胶部和鼠蹊部皮下注射..,oZ,以后每次递增oZml,6,注射最高每周两次静脉注射第一次接种ml大约经过周一,。,。剂量为2ml最高剂量重复两次最低凝集效价不得低于1:800否则要追加注射待检猪血清5份,1,系成都兽药厂生产;2份和其中猪瘟血清份猪萎鼻阳性血清,;。阴性血清2份系南京畜禽研究所提供其余50份猪血清从青岛肉联厂屠宰猪采集试:管凝集试验··o5肠l,,用石炭酸盐水将血清从:10开始作对倍稀释加入等量抗原(04ml)在,。52℃水浴箱内孵育过

6、夜后检查结果,上部,。判定标准按常规(阳性者液体清亮管底呈絮状沉淀)试验结果;。。。一ZP二型参考株S,,用H和丹麦IIP株分别制备的兔高免血清均与HP二型抗原。,。。,,。,。。产生特异性凝集杭S兔高免血清与S抗原的凝集效价比与HP抗原凝集效价高,。,一个滴度反之亦如此而两种二型抗原与5份猪血清(包括猪瘟血清1份猪萎鼻阳2,。性血清份其它猪血清52份)均不产生凝集讨论,、本研究中作者对胸膜肺炎嗜血杆菌二型株所制备的抗原抗血清进行血清学初步,。研究认为试管凝集试验可用于HP二型株的血清学诊断,二型株在HP的9个血清型株

7、中为毒力较弱菌株(相当于1型株毒力的十分之一。然而我们,到百分之一)在制备HP二型兔高免血清中当高免剂量首次达最高注射剂量(,,,2ml)时即发生个别兔子死亡现象这说明本菌抗原的毒素反应很强故其它兔继,。·unn,,续高免时作了适当的稀释这正象AGnarsso所强调的每个型高免时至少选。用4只兔为宜,,本试验中应用待检猪血清5份均呈阴性反应然而试验中还缺少HP阳性猪血清的,。对照待作者进一步试验补充一)参考文献.........1Gtnnarsson,etaetes,o38No:6Pllll1114,1977AlAmJ

8、VRVl一........2Gunnarsson,AetalAmJVetRes,Vol39,No:8P12861292,1978一.........3tta,etaneroo,o15,o:6PIO191023,1982MilKRlJCliMibilVlN一......4Ma,etaerssneternarylaoratoryagn

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