猪传染性胸膜肺炎的血清学调查

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1、猪传染性胸膜肺炎的血清学调查摘要：为了解本地生猪传染性胸膜肺炎感染情况，作者应用ELISA试验对本市15个规模猪场共计300份血清样品进行猪传染性胸膜肺炎抗体监测，结果显示:被检样品猪传染性胸膜肺炎抗体阳性率为0％-30%,平均为14.33％，表明本地规模猪场有猪传染性胸膜肺炎感染，情况不容乐观。关键词：猪，传染性胸膜肺炎，血清学调查猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(aeti—nobacilluspleuropneumoniae，APP)引起的以出血性纤维素性胸膜炎为病理特征的一种严重的呼吸道传染病，能引起猪急性纤

2、维素性胸膜肺炎或慢性局部坏死性肺炎[1]。该病是由英国Paffion在1957年首次发现并报道，以前称为副猪嗜血杆菌病(Hpp)[2]。在我国，哈尔滨兽医研究所于1987年发现临诊病例，杨旭夫于1990年对此进行了首次报道[2]。1990年我国首次确诊，现已成为集约化猪场常见病之一，大多数养猪国家和地区中均有不同程度的发生和流行，我国已有2O多个省市报道有该病的存在。本病一旦发生则很难根除，且易与其他疫病(如伪狂犬病)混合感染，可给养猪业造成巨大经济损失[3]，此病已引起业界的高度关注。为了解本病在江苏省淮安市的感染情

3、况，以便确定预防和控制该病的有效方案，笔者在该地区进行了猪传染性胸膜肺炎的血清学调查，现将结果报告如下：１材料与方法1.1材料1.1.1诊断试剂猪传染性胸膜肺炎ApxⅣ-ELISA抗体检测试剂盒，武汉科前动物生物制品有限责任公司生产，批号：120401，购自江苏力通生物技术有限公司。1.1.2被检血清猪血清300份，采自淮安市清浦区、淮安区、淮阴区、涟水、洪泽、盱眙、金湖7个县（区），被检猪场均没有注射该病疫苗；前腔静脉采血后自然凝固，分离血清，各血清样品清亮，无溶血，置冰箱４℃保存备用。1.1.3试验仪器酶标检测仪，

4、洗涤器，50μl、100μl精确微量移液器，一次性移液器吸头，稀释样品的U型96孔稀释板等。1.2监测方法1.2.1配制洗涤液将浓缩的洗涤液恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解，然后用蒸馏水作20倍稀释。1.2.2待检血清和对照稀释 待检血清在血清稀释板中按1:40的比例稀释，对照血清在血清稀释板中按1:4的比例稀释。1.2.3 操作步骤 1.2.3.1 取抗原包被板，将稀释好的待检血清、阴性对照和阳性对照各取100μl加入到抗原包被板中，阴、阳性对照各设2孔。轻轻振匀孔中样品，置37℃下温育30分钟。1.2

5、.3.2 甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗板5次，200μl/孔，每次静置3分钟后倒掉液体，并在干净吸水纸上拍干。31.2.3.3 每孔加羊抗猪酶标二抗100μl，置37℃下温育30分钟。1.2.3.4 洗涤5次，方法同1.2.3.2。1.2.3.5 每孔加底物液A、底物液B各1滴（约50μl），混匀，置室温下（20～25℃）避光显色10分钟。1.2.3.6 每孔加终止液1滴（约50μl），10分钟内测定结果。1.3 判定 在酶标仪上测各孔OD630nm值。试验成立的条件是：阳性对照孔OD630nm值均≥0.6，且小于1.

6、6；阴性对照孔OD630nm值均＜0.3。如果S（样品孔OD630nm值）≥P（阳性对照孔平均OD630nm值）×0.25，判为阳性；如果S＜P×0.25，则判为阴性。２监测结果监测结果详见表1表１猪传染性胸膜肺炎ApxⅣ-ELISA抗体检测结果场名监测数阳性数血清抗体阳性率（%）楚复20315楚徐20420洪富20210洪种20210淮种2000金绿20210金天20210金总20315涟宏20420涟寿20525涟野20420浦黄2000浦盐2000盱古20630盱穆20630合计3004314.333讨论本文作者

7、首次对江苏淮安地区猪场的猪传染性胸膜肺炎进行血清调查，证实了淮安市规模猪场中存在猪传染性胸膜肺炎感染，被检猪场该病的阳性率平均为14.33%，15个被检猪场，有12个检出阳性，猪场阳性率80%(12/15)。据任荣清,蔡一鸣,杨莉等报道，贵州猪传染性胸膜肺炎感染率为10%~90%,平均阳性率为38.5%[4]，周锦萍、孙泉云、沈悦鞠等对上海地区13个种猪场传染性胸膜肺炎的血清学调查表明，有11个猪场存在猪传染性胸膜肺炎的感染，阳性猪场高达84.6％，各场阳性率从0％至90％不等，平均阳性率为30.3％[5]，淮安的阳性

8、率明显低于贵州和上海的平均水平。本次监测结果表明，淮安市部分猪场感染率较高，达到30%，部分猪场没有检出阳性猪，说明部分猪场防疫工作搞得较好，部分猪场防疫工作相对薄弱，尚需进一步加强。3淮安市是全国养猪重点地区，尽管感染率相对比较低，但是外界形势不容乐观，仍然应该对该病给予足够重视。要加强对种猪的管理，杜绝本病随种猪蔓延。强化检疫