茄子游离小孢子培养中小孢子发育的细胞学观察

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1、农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2007,15(5): 861~866·研究论文·茄子游离小孢子培养中小孢子发育的细胞学观察*佟曦然, 顾淑荣, 朱至清, 蒋钟仁, 张树根,惠志明, 李春玲**（北京市海淀区植物组织技术实验室,北京10091）摘要：以茄子（L.）杂交F1代的植株为材料，通过游离小孢子的培养，对小孢子脱分化和再分化形成再生植株的发育途径，进行了较为详细的形态细胞学观察。结果表明（,1）小孢子进行均等分裂和营养细胞分裂两种方式都能形成胚状体或愈伤组织。生殖细胞仅分裂

2、1~2次；（2）多细胞小孢子从花粉沟或萌发孔突出来脱掉花粉壁；（3）花药组织在胚状体形成过程中起着重要作用；（4）从获得的再生植株中，随机取37株进行根尖细胞染色体观察发现，22株为单倍体，14株为二倍体，1株为四倍体。关键词：茄子；游离小孢子培养；愈伤组织；胚状体；细胞学观察中图分类号：S184文献标识码：A 文章编号:10061304(2007)05086106CytologicalObservationsonAndrogenesisinIsolatedMicrosporesCulturesofEggplant TONGXir

3、an, GUShurong,ZHUZhiqing,JIANGZhongren,ZHANGShugen,HUIZhiming,LIChunling** ()AnthersfromtheFl hybridsofeggplant(L.)wereusedastheexperimentalmaterial.Thecalli,em bryoidsandplantletswereobtainedthroughisolatedmicrosporeculture.Theresultswereasfollows:(1)Mostofcalliandem

4、bryoids werederivedfromdivisionofvegetativecellofculturedmicrosporesbutsomeofcalliandembryoidsweredevelopedfromtheequal divisionofmicrospores.Thereproductivecelldividedonly1~2times.(2)Themulticellularmasseswerereleasedfromthepollenditchorthegerminalapertureofmicrospor

5、es.(3)Theanthertissueswerebeneficialforinductionofembryogenesisinisolatedmicrospores.(4)Thechromsomenumberwasexaminedincellsofroottipsof37randomlyselectedtheregeneratedplantsamongwhich22werehaploids,14diploidsand1tetraploids.eggplant;isolatedmicrosporesculture;callus;

6、embryoids;cytologicalobservation游离小孢子培养是将花药组织培养提高到细胞和物力的集约化特点，因而正在逐渐取代花药培养，培养水平的一种实用技术。研究表明，在花药培养中成为蔬菜、粮食作物甚至牧草遗传育种的一个重要始终存在着二倍体组织与单倍体组织相互混杂的干手段，国内外不断有成功报道（朱至清,2002;Yang, 扰（Lia,2005）；来自外部的人为调控必须经过药壁.,2006;Cistu佴.,2006;Bayliss ,2004）。同组织的演绎才能作用于小孢子的雄核发育过程，这时，小孢子培养技术也为细

7、胞学、分子生物学及遗传必然影响到调控的准确性和效率；实验结果是二倍工程等学科的研究提供了一个良好的平台。体组织、雄核发育过程和外部培养环境相互作用的茄子是一种重要的世界性蔬菜，现代生物技术混合结果，不能对小孢子对培养产生的反应做出明在茄子遗传育种与种质创新方面已有许多研究(马确的评价。利用小孢子游离培养诱导单倍体再生植欣等，2006)。茄子游离花粉培养的报道很少(顾淑荣, 株，显然比用花药培养优越得多，它不仅能排除花药1979；Miyoshi,1996；连勇等,2004)，特别是茄子游离壁及花丝等体细胞起动的干扰，便于实验结果的分

8、小孢子脱分化和再分化过程中的细胞学观察资料不析；而且具有用材少，占用空间小，可节省大量人力足，对茄子雄核发育过程的了解不够充分，成为将游*基金项目：北京市科技计划项目（No.Z0006321000891）资助。**通讯作者。Autherforcor