绒毛染色体核仁形成区的观察

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1、遗兰上些目)I工AS(Beiiing)14(4):35-361992绒毛染色体核仁形成区的观察王汝斌(北京市海淀医院内科,100080)冯杏林肖展刘权章李矍(哈尔滨医科大学医学遗传研究室,150086)应用DNA-RNA分子杂交技术,证明人本在室温下放置3-5天。将标本放人生理盐类的18-28S核糖体基因(rDNA)位于核仁水中浸泡10分钟(有利于银染),然后用蒸馏水形成区(NOR)。应用银染技术可使NOR呈冲洗干净、吹干。把标本置人潮湿平皿内用擦特异性着色(黑色)。此后,进一步证明银染物镜纸覆盖,加50%AgNO33滴,1外甲酸-2

2、关明质不是:DNA,也不是:RNA,而可能是核仁胶混合液1滴的新鲜混合液。把平皿移至表面形成区特异的蛋白质,即和rRNA转录相联系温度达60-65℃水浴箱内约1-2分钟,玻片的酸性蛋白质,因而,银染能在细胞水平反映出呈黄色时移去擦镜纸,然后用蒸馏水冲去残液。xRNA的转录活性。银可染性取决于rDNA以1:20的Giemsa染液复染1-2分钟,气干的有无、数量、转录活性及与染色有关的技术因后镜检可见有转录活性的NOR染色呈黑色,素141。一般认为,rDNA转录活性主要受其转染色体臂呈褐黄色。录速率及有转录活性的rDNA数目的调控[510

3、(三)观察指标所以,银染法是目前探讨rDNA功能的一个准选择染色清晰、分散良好的完整中期分裂确方法[1]0相,分析绒毛、新生儿脐带血和成人外周血细胞银染核仁形成区(Ag-NOR)和银染近端分裂相分别为352,284和295个。用单盲法于着丝粒染色体联合(Ag-AA)是rDNA活性油镜下计数Ag-NOR均数/细胞和D,G染大小的指标。为了探讨绒毛细胞rDNA活性及色体组的Ag-NOR均数,根据近端着丝粒染其特点,我们用银染技术对孕早期绒毛细胞进色体间有无银染物连接,计数Ag-AA的频率行了研究。和银染近端着丝粒着色体联合的染色体(Ag-

4、AAC)数。见图1、图20材料和方法(一)材料来源结果取20例孕龄7-11周孕妇的人工流产绒(一)Ag-NOR频率(表1)毛,10例新生儿脐带血和12例健康成人(男经统计学处理,D组Ag-NOR在绒毛与脐性,19-20岁)外周血作分析对象。带血之间无显著性差异(,一1.08,P>0:01),绒(二)方法毛与外周血间有极显著性差异(,~3.66,P<将流产的绒毛孵育10分钟,按直接法制片。脐带血和成人外周血采用半微量全血培养WangRubine:al.:ObservationsontheNucleo-法(48小时),常规制片。银染方法参

5、照周宏运IttsOrganizerofMetaphaseChromosomesActivityofAg-NORsinChorionicVillus等[21的改良方法,并在此基础上进行了改进。标本文于1991年3月19日收到。35图1绒毛细胞染色休Ag-NOR(个示Ag-NOR)图2绒毛细胞染色体Ag-AA(个示Ag-At?.)表1各染色体组Ag-NOR预率(Ag-NUR均血间无显著性差异(t一1.00,P>0.05);G组橄/细胞)Ag-AAC在绒毛与脐带血、外周血之间无显著组别例数D组G组总频率土SE性差异(t~1.09,P>0.0

6、5;,一0.90,P>i一一一一一绒毛IZ03,,:1一3.206.71士0.110.05),脐带血与外周血之间无显著性差异(:~新生儿脐带血L03.32{{2·245.56-1-0.330.38,P>0.05);Ag-AAC总频率在绒毛与脐成人外周血12.79}2.174.94土0.12‘,一I带血、外周血之间无显著性差异(tm0.86,P>0.01),脐带血与外周血之间无显著性差异(,一0.05;‘一1.14,P>0.05),脐带血与外周血之1.97,P>0.05);G组Ag-NOR在绒毛与脐带间无显著性差异(;~0.38,P>0

7、.05);Ag-AA血之间有极显著性差异(,~5.99,P<0.01),在绒毛与脐带血、外周血之间无显著性差异绒毛与外周血间有极显著性差异(t=8.14,(,~0.77,P>0.05;t一1.04,P>0.05),脐P<0.01),脐带血与外周血之间无显著性差异带血与外周血之间无显著性差异(t-0.62,(t一0.39,P>0.05)oAg-NOR总频率在绒P>0.05),毛与脐带血、绒毛和外周血之间均有极显著性讨论差异(,~4.53,P<0.01;t=10.63,P

8、理、病理情况下,通过Ag-NORP<0.05)。观察,可以分析有功能活性的rDNA动态变(二)Ag-AAC/细胞及Ag-AA/细胞化。每个个体都具有一定的Ag-NOR数,而(表2)且,Ag-NOR的形态也有一定遗传特性[

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