5食品有害微生物快速检测

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1、研究报告生命科学仪器2008第6卷/4月刊食品有害微生物快速检测王布强，陈祥贵（西华大学生物工程学院，成都，610039）摘要本文简单的阐述了色谱技术、阻抗技术、高效液相技术、免疫分析技术、传感器技术、分子生物学技术以及仪器方法在食品有害微生物快速检测中的应用。关键词食品；快速检测；方法随着国内市场和进出口贸易对食品安全的重算机控制，可自动记录、显示和打印报告结果；可视，食品的微生物检测技术也面临着更大的压力。传进行食品工业中所需的多种微生物试验及原材料、生统的检测技术非常繁琐，需要耗费大量的人力物力，产线、成品的检测；对干扰传统平板计数的不透明而且检测周期长、灵敏

2、度低，难以满足目前国内外对样品及小颗粒物质的检测优势明显，检测结果不受影食品安全检测的要求。这就要求将一些先进的快速响；再者，由于阻抗法是通过测定代谢物产生速方法引进到食品微生物的检测中来，由原来的培养度，将培养基中微生物数量与其活动相结合，因而水平向分子水平迈进，向仪器化、自动化、标准化方在预测食品保藏质量等方面比平板计数法更有意义。向发展。目前阻抗法在食品检测中的应用范围日益广泛，比其他快速方法学有更多的发展，在某些行业如乳制品行1色谱技术业，可考虑采用阻抗法作为总的质控工具，进行食其原理是将微生物细胞经过水解、甲醇分解、品微生物快速检测。提取以及硅烷化、甲基化

3、等衍生化处理后，使之分离[2]3高效液相技术尽可能多的化学组分供气相色谱仪进行分析。不同的微生物所得到的色谱图中，通常大多数的峰是共性的，高效液相色谱法又称作高压液相色谱法(High只有少数的峰具有特征性，可被用来进行微生物鉴定，PressureLiquidChromatography)简称作HPLC，是近年分析检测各种常见细菌、酵母菌、霉菌等。来迅速发展起来的一项新颖的分离技术，应用于食品安全指标快速检测取得良好效果。2阻抗技术[1]高效液相色谱法是在原有的液相柱层析基础上，阻抗是指交流电通过传导材料时遭遇的阻力。引人气相色谱理沦，并加以改进和发展起来的。它与基于

4、此基础上发展起来的阻抗微生物学是用电阻抗作液相柱层析不同之处在于应用了颗粒直径小(5～10um)为媒介监测微生物代谢活动的一种快速方法学。微生的高效层析柱填充剂，以及配用了高压输液泵、高灵物生长时可将培养基中一些大分子营养物质如蛋白质、敏度检测器和自动扫描收集装置，从而使它在分离速碳水化合物等分解转变为较小且更为活跃的分子如氨度上比起液相柱层析要快数十倍至数百倍。该方法不基酸、乳酸等吸收利用。当培养基因微生物代谢活动仅分离速度快、检测效率高，而且自动化程度达到了而发生上述化学改变，细菌产生的离子浓度比培养基气相色谱法水平。同时又保持了液相色谱法对试样适初始离子浓度稍

5、低时，阻抗发生改变，利用仪器测定用范围广，移动相改变的灵活性大和便于大量制备的阻抗的微弱变化，可快速监测微生物的存在及进行定优点。高效液相色谱法由于兼备液相和气相两种色谱量分析。分析方法的优点，检测国家标准方法(GB/T5009—同传统方法相比，利用阻抗法可快速监测食品中1996)。近年，在保健食品功效成分、营养强化剂、维微生物污染，绝大部分可在24h内鉴定出微生物污染，生素、色素、香料、农药残留等方面的检测也得到了而令人关注的高度污染样品则可更早检出；运用阻抗广泛应用。世界上约有80％的有机化合物可以用法进行食品检测操作简便，劳动强度低，检测受计HPLC来分析测定

6、。作者：王布强（1980-），男（汉），硕士，食品生物技术17综述生命科学仪器2008第6卷/4月刊4免疫分析技术示意见图1。根据检测信号不同，可将生物传感器分为电化学生物传感器、压电生物传感器和光生物传免疫检测的基本原理是抗原抗体反应。抗原抗感器；又按照生物活性单元不同，可分为酶生物传体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合感器、微生物生物传感器、DNA生物传感器和免疫反应。不同的微生物有其特异的抗原，并能激发机体生物传感器。产生相应的特异性抗体。在免疫检测中，可利用单克隆抗体检测微生物的特异抗原，也可利用微生物抗原检测体内产生的特异抗体，两种方法均能判断机

7、体的感染状况。免疫学法在食品检测中应用最广，此技术是以抗原与抗体的特异性反应为基础，通过病原物刺激机体产生免疫球蛋白(抗体)建立的。根据检测技术的不同可分为免疫扩散法、凝集反应、酶联免疫吸附法和探针检测法。牛津沙门氏菌乳胶凝集检验(OSRT)法5.1酶生物传感器使用了为沙门氏菌菌体抗原和鞭毛抗原均具特异性的酶生物传感器是生物传感器的先驱，早在1962抗体；特异Microscreen法同样使用了对菌体鞭毛抗年由Clark提出，现在已经广泛应用于食品安全性检原具特异性的抗体，特异性能达到96％。还有利用测中。其特点是高度专一性，但价格昂贵，稳定性免疫反应的免疫磁球技