食品微生物快速检测技术分析.doc

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1、食品微生物快速检测技术分析　　【摘要】：食品是人们生存的重要物质基础，对人类发展具有重要作用，因此人们始终将食品安全作为关注的重点。但在食物生产过程中，由于各种因素的影响，食品中残留了许多微生物细菌，这些细菌用肉眼看不到，需采用显微镜镜检法或琼脂平板培养法进行检验。但随着我国工业的不断发展，食品种类越来越多，病原微生物种类也越来越多，传统的食品检验方法已难以满足要求，应采用快速检测方法，以此提高检测效率。　　【关键词】：食品；微生物；快速检测　　1、食品微生物检验环境　　进行食品微生物检验必须要确保食品微

2、生物检验环境的无菌，达到无菌条件则须先进行消毒，主要任务是将微生物进行灭活，避免微生物再次生长。我国现在主要使用的消毒技术有紫外线消毒，紫外线消毒主要为：在室温下，220V，30W紫外灯下方垂直位置lm处的253.7nm紫外线辐射强度应≥70μW/cm2。臭氧消毒主要为：封闭无菌室内，无人条件下内作业。　　2、免疫学方法　　2.1免疫层析技术　　免疫层析技术是一种新兴的免疫测定技术，检测原理为在膜的毛细管作用下，被检测对象发生移动，方向朝着另一端，在此过程中，抗原和抗体会结合、固化、分离，最后根据颜色变化

3、检测食品。目前较为受欢迎的为胶体金免疫层技术，并且已广泛运用在食品产业中。该技术具有操作简单、无污染等优点，，采用免疫层析技术检测布氏杆菌、沙门氏菌等细菌能够获得良好的效果。　　2.2免疫磁珠技术　　抗对抗免疫磁珠分离法将为磁珠微球技术和免疫化学技术两种技术有机结合，该技术比免疫层次技术更加的快速、高效。　　2.3酶联免疫吸附技术　　该技术主要是将放射免疫技术和荧光技术有效结合，采用该技术检测时，通过充分利用抗原抗体的特异性，将免疫酶染色，进而得出相应的结果，实现食品中微生物的检测。　　2.4免疫荧光技术

4、　　免疫荧光技术荧光标记活性抗原体，在显微镜下可看到明显的荧光，进而检测食品微生物。免疫荧光法主要用于检测沙门氏菌，具有用时短、操作简单等优点。　　3、细菌计数法　　3.1流式法　　流式法主要利用激光技术实现细胞浓度的识别。流式法主要有以下几个步骤：采用激光技术照射样品；密切观察样品是否存在反射；分析样品，包括细胞大小与散射光间的关系、细胞膜抗原强度和激光亮度间关系；得出最终的结论，并详细记录结果。采用流式法，不仅可以观测到微生物的形状，同时还可以明确微生物数量。该技术主要应用于检测牛奶中的菌落数。在检测

5、过程中，检测结果一定程度上会受到蛋白质的影响，采用流式法可有效解决这一问题，可在短时间内快速检测出牛奶中的细菌及活性酶，近年来该技术逐渐成熟，希望该技术能得到推广。　　3.2固定式计数法　　固定计数法，又称为SPC计数法，通常采用该方法检测单个微生物或革兰氏阴性菌，该方法的特点是比较细腻。　　4、传感器检测法　　4.1基因传感器法　　基因传感器法主要是指将一个已知核苷酸序列的半单链DNA分子固定在传感器上，并使其与另外一条互补的目标DNA杂交，进而组成一条双链DNA，并通过换能器反映传达出的物理信号。基因

6、传感器法优点在于操作简单、灵敏度高。目前我国基因传感器有很多种，主要包括两种类型的基因传感器，一种为电极电化学式DNA传感器，另一种为石英晶体振荡器。　　4.2生物传感器　　采用生物传感器检测，被测分子与生物接收器上的敏感材料接触，并产生一系列的化学反应，之后会传达出一系列信号，如颜色、离子强度等。该检测方法具有较高的灵敏度。检测食品中少量的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等，可以采用酶免疫电流型生物传感器，能够获得良好的检测效果。代谢法　　4.3阻抗法　　采用阻抗法检测，首先需要花费一定的时间培养相关

7、微生物，使原来的惰性底物成为活性底物，此时培养基的阻抗性会有所降低，电导性会有所上升。之后操作人员应观察阻抗的变化情况，并分析检测微生物。该方法优点在于检测效率高。　　4.4放射法　　放射法是一项全新的检测方法，它将物理原理和化学方法充分结合，在检测过程中，首先完成细菌培养，并进行标记，之后发生化学反应，生成一氧化碳，通过分析一氧化碳，得出结论。该方法的优点在于准确度高、应用范围广。　　4.5干片法　　干片法是�⒁恍┪藓Φ母叻肿硬牧戏湃胧称分校�监测食品中的微生物，该方法主要以微生物即高分子学为基础，是一

8、种综合性检测方法。由于该方法非常简单、易操作，且携带方便、成本低，该方法是食品微生物检测一种常见的方法。　　5、快速检测方法的不足　　通过以上对不同检测技术的分析可知，不同的快速检测技术有其独特的优势和最佳的使用范围，很多的快速检测技术具有食品专一性，对于一个特定的食品检测性能最佳。但与此同时，许多检测手段又在某些方面存在一定的局限性。比如，PCR及其衍生技术所需的仪器设备价格非常昂贵，非一般实验室能承受，所以限制了其在我国食