女金丹对雌性大鼠卵巢HCG受体的影响★

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1、女金丹对雌性大鼠卵巢HCG受体的影响★新中医1999年第3期第31卷实验研究作者:吴清和?李育浩?陈 军?韩 坚?梁颂名单位:吴清和?李育浩?陈 军?韩 坚?梁颂名 广州中医药大学中药学院,广州市机场路12号大院关键词:@女金丹;药理学;HCG受体;大鼠;动物  提 要 通过研究女金丹对雌性大鼠卵巢HCG受体的影响,以进一步阐明女金丹调经助孕的机理。结果发现女金丹可明显提高卵巢HCG受体的特异性结合量,增强其亲和力,其受体数目也有增加的趋势。表明了女金丹能增强卵巢的功能,与其能明显提高卵巢HCG受体的特异结合量,增强亲和力有一定的关系。  女金丹又名胜金丸、不换金丹,是古代治疗女性月经不调

2、、不孕症的名方。全方由香附、当归、川芎、白芍、人参、茯苓、延胡索、牡丹皮等16味药组成,具有疏肝理气、益气养血、活血散瘀、调经助孕的作用,临床沿用多年,疗效显著。为阐明女金丹调经助孕的药理作用,本课题研究了女金丹对雌性大鼠卵巢HCG受体的影响,现将研究结果报告如下。  1 材料与方法  1.1 实验药物 女金丹:采用水煎、收取挥发油、醇沉(含醇量为50%)的方法,制成每ml含生药2g的浓缩液,置冰箱保存,用时以蒸馏水配成所需浓度(所用药物均从本校第一附属医院购入,并经本校中药学院药物鉴定教研室鉴定);调经丸:广州中药一厂产品,批号:9307015;己烯雌酚:广州明兴制药厂产品,批号:930

3、522-20;  1.2 实验动物 Wistar大白鼠(合格证号:94018),由广州第一军医大学实验动物中心购入。  1.3 主要试剂 Tris试剂:德国Boehringer Mannheim公司产品,批号:950401。HCG:美国SIGMA公司产品,批号:950412。BSA:上海长阳生化制药厂产品,批号:940627。125I-HCG:中国原子能科学院同位素所产品,比度为70 uci/ug,纯度为92%,用时以Tris-HCL缓冲液(0.04M,pH为7.4,内含0.005 mol/L的MgSO)配制。批号:950917。  1.4 方法 选取健康未成熟雌性大鼠32只,体重70~9

4、0g,随机分为蒸馏水组、阳性对照(调经丸)组和女金丹大、小剂量组,每组8只。灌胃给药,每日1次,连续10天。末次给药后禁食12h,称体重后处  死动物,剖取卵巢精密称重并留作受体测定。卵巢HCG受体的测定,参照文献方法〔1、2〕先测定其总结合量,然后测定其特异结合量、卵巢HCG受体的数目、计算亲和力等。为了测定卵巢HCG受体的非特异性结合量,在每一测定管同时作一平行测定管,其中加入过量的非标记HCG(2000ng),以抑制特异结合,同上法测得非特异性结合量。总结合量减去非特异性结合量,即为卵巢HCG受体的特异结合量,以HCG(pg/10 mg卵巢)表示。  此外,为了测定卵巢HCG受体的数

5、量及其对HCG标记物的亲和力,需对同一组织匀浆作一系列的结合试验。向各测定管加入不同剂量125I-HCG,测定计算出卵巢HCG受体的特异结合量。另以各管加入的125I-HCG的量为横坐标,相应的特异结合量为纵坐标,做特异结合曲线,并且做Scalchard分析〔3〕。求出每mg卵巢组织之最大结合量,代表卵巢HCG的受体数目,并求出解离常数(Kd),代表亲和力。  2 结果  2.1 女金丹对大鼠卵巢HCG受体结合力的影响 见表1。  2.2 女金丹对大鼠卵巢HCG受体数的影响 见表2。表1 女金丹对大鼠卵巢HCG受体结合力的影响(±s)组别n剂量  (g/kg)对125I-

6、HCG的结合力(pg/10 mg卵巢)总结合力非特异性结合力特异性结合力蒸馏水8-108.3±30.290.2±21.918.1±11.1调经丸87.5162.5±58.3※123.1±55.139.4±19.2※女金丹低剂量87.5150.0±48.3120.1±40.729.9±15.6女金丹高剂量815.0211.6±80.6※ ※168.9±76.9※42.6±19.0※ ※  注:与蒸馏水比较,※P<0.05;※※P<0.01(下同)表2 女金丹对大鼠卵巢HCG受体数的影响(±s)组别卵巢系数  (mg100g体重)卵巢HCG受体总数  (×10-4nM)卵巢HCG受体亲和力  

7、(×10-3nM蒸馏水35.28±10.2713.56±5.4335.56±12.32调经丸55.11±9.19※※17.70±2.3313.14±4.87※※女金丹低剂量51.38±8.44※※17.26±4.5621.73±7.71※女金丹高剂量56.81±15.25※※18.32±4.9810.64±3.26※※  从表1和表2中可知,女金丹大剂量可促进未成熟雌性大鼠卵巢的发育,提高卵巢HCG受体的特异结合量和亲和

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