壬基酚对雌性sd大鼠免疫系统功能影响的研究

壬基酚对雌性sd大鼠免疫系统功能影响的研究

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1、苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名:重渔叁日期:里?2巾牟.口/苏州大学学位论文使用授权声明嬲剿煳本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,即:学位论文著作权归属苏州大学

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3、壬基酚对雌性sD大鼠垒壅墨竺垫丝墅堕堕堕壅主奎塑至中文摘要目的:壬基酚(nonylphenol,NP),又称壬基苯酚,常温下为无色或淡黄色液体,略带苯酚气味,几乎不溶于水,溶于丙酮,是一种重要的精细化工原料和中间体,主要用于生产表面活性剂、也用于抗氧剂、纺织印染助剂、润滑油添加剂、农药乳化剂、树脂改性剂、树脂及橡胶稳定剂等领域。NP是有代表性的环境内分泌干扰物,其对生物体产生的不良作用包括影响内分泌、影响生殖和发育、影响免疫及促癌作用等。目前,国内外对壬基酚毒性作用的研究主要集中于探讨其对生殖系

4、统造成的损伤及其机制,而关于壬基酚对免疫系统毒性影响方面的研究较少,且尚无壬基酚对生殖免疫影响的报道。本课题通过研究壬基酚慢性染毒对雌性SD大鼠脾脏、胸腺组织及其淋巴细胞的损伤作用,并同时检测大鼠血清IFN吖、IL.4含量和脾脏、胸腺、外周血NK、NKT细胞水平,探讨壬基酚对雌性大鼠免疫系统功能的影响,并初步探讨壬基酚致机体免疫系统功能损伤的可能机理,为进一步探索壬基酚致机体免疫损伤的机制提供科学依据。方法:选用32只健康8~9周龄SPF级雌性SD大鼠,适应性喂养一周后,按体重随机分为溶剂对照组

5、(玉米油)和低(20mg/kg)、中(80mg/kg)、高(200mg/kg)剂量壬基酚染毒组,每组8只。采用灌胃方式进行染毒,灌胃容量5ml/kg,隔天染毒1次,连续60d。(1)体重和一般情况观察隔天称1次体重,密切观察各组动物的一般状况变化,如被毛、粪便、行为、精神状态等;(2)大鼠处死后,腹主动脉采血,2h内进行动态血常规检测,观察外周血血液参数改变;(3)苏木精-伊红(HematoxylinandEosin,HE)染色,观察各组间胸腺、脾脏组织病理学改变;(4)腹主动脉取血,离心分离血

6、清,采用酶联免疫间接法测定大鼠血清IFN吖、IL.4的相对含量;(5)用荧光标记的抗体进行染色,流式细胞仪检测胸腺、脾脏、外周血NK、NKT细胞含量;(6)采用流式细胞术,通过相应的荧光探针检测不同浓度NP处理组大鼠脾脏、胸腺淋巴细胞内活性氧(ROS)(用荧光探针DCFH2DA)、游离钙离子([ca2+】i)浓度(用荧光探针Fluo.3AM)、线粒体膜电位(MMP)(用荧光探针JC.1)水平的变化;(7)采用流式细胞仪,主奎塑墨一.壬基酚对雌性sD大鼠免疫系统功能的影响研究通过碘化丙啶(PI)染

7、色观察不同NP染毒组间脾脏、胸腺淋巴细胞细胞周期和凋亡率的变化。结果:(1)随NP染毒剂量增加,大鼠体重呈下降趋势,差异有统计学意义(尸

8、比率、嗜酸性粒细胞比率明显降低,差异有统计学意义(尸<0.05);各组大鼠外周血红细胞计数、血小板计数无明显变化;高浓度NP染毒组血红蛋白含量略高于对照组,差异有统计学意义(尸

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