番茄红素简便测定方法的建立

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1、万方数据万方数据食品与发酵工业FbodandFe皿entationIndu吼d曲voI．27No．32番茄红素在不同溶剂中的紫外图谱将上述番茄红素及B．胡萝h素样品分别溶解在1．25种常用的溶剂中，在300～600nm范围内进行扫描。得出的吸收光谱如图1所示。图1番茄红素(一)及争胡萝卜素(⋯)在不同溶剂中的吸收光谱番茄红素及B_胡萝h素在不同溶剂中紫外吸收光谱吸收峰情况如表1所示。衰l番茄红素与肛胡萝h素在不同溶剂中的吸收情况nm溶剂番茄红亲吕胡萝h紊石油醚4“．470．502425，448，478石油醚(古2％Mccb)444．470．502425．4

2、48。478正己烷446．472．504426，450，478苯458．484．522438，464，494甲苯456．484。520438．462．492四氢呋晴458．486．522440，464，494由表1可以看出．番茄红素在几种不同溶剂中均有类似的吸收峰，并且峰的形状也很相象，只是峰的位置稍有变化；无论在何种溶剂中，均以中间的峰为最强，其在较短波区及较长波区的吸收也很强，但比最高峰稍弱。这大概是通常的紫外分光光度法中均以此峰作为测定基准的原因。但是也应该注意到，在番茄红索的最强吸收波长时，B一胡萝h素(番茄红素提取物中的主要类似物)的吸收也很强，

3、所以B-胡萝h对番茄红索含量测定值的影响也会很大；而如果选择3个最大吸收峰中较长波区的峰作为测定波长，5020nm吸收峰吸收强度也很大，基本上是472nm吸收峰的90％以上，而此时B_胡萝h素的吸收却很小，可以避免其影响。对比番茄红素及B．胡萝b素在5种溶剂中吸收光谱后可以看出，两者在正己烷及石油醚中的吸收光谱特征更明显，而且这2种溶剂本身又没有紫外吸收．因而适合作为测定用溶剂；由于石油醚价格更便宜且易于得万方数据第27卷第3期张连富等：番茄红素简便测定方法的建立53到，所以研究中选择石油醚作为溶剂；同时考虑到测定提取产物时，由于番茄红素浓度较高，而其在石

4、油醚中的溶解能力又较差，实际操作中极易造成番茄红紊的过饱和，使测定结果低于实际值；如果先以占石油醚总量2％的二氯甲烷溶解后．再加入石油醚充分分散，则可以较好地解决番茄红素的溶解问题。如图1所示，番茄红素在含2％二氯甲烷的石油醚中的紫外吸收特性未发生改变。本文拟以此为依据．确定出一个更为适用的番茄红素的紫外分光光度测定法。3番茄红素标准曲线的绘制准确称取经真空干燥的(45℃，30min)的番茄红素纯品2．Omg，在100mL容量瓶中用2．0mL二氯甲烷溶解后，以石油醚定容，必要时(室温较低时)可在超声振荡器中处理以确保番茄红素彻底溶解，然后迅速将上述番茄红素

5、标准液稀释成不同的浓度，分别在502nm处测定出其吸光度值，并以吸光度值对番茄红素浓度作图，得出番茄红素标准吸收曲线如图2所示。番茄红紊浓度／斗g-mL_1图2番茄红素的浓度一吸光度标准曲线4测定方法的检验4．1回归方程的检出限及线性范围根据IuPAc对检出限LD的规定，用分光光度计进行分析时，可测量的最小分析信号A一为：AⅡli。=Ab+KSb其中Ab为多次空白测量的平均值，Ksb为多次空白测量的标准偏差，K为一定置信水平下确定的系数。当置信水平为90％时，K=3，此时与Amm—Ab相对应的浓度即为该方法的检出限LD：LD=(A肌。一Ab)／S=KSb／

6、S式中s为方法的灵敏度，即回归方程的斜率S=O．3078。根据20次空白试验的结果，计算出Ab=0．000075，sb=O．000175。由此计算出方法的检出限LD=0．00l7地／mL，即方程在0．0017～3．12Hg／ml浓度范围内服从朗伯．比耳定律，也就是说，当溶液中番茄红素的浓度在0．0017～3．12pg／mL范围内时，该检测方法的可信度在90％以上。4．2回归方程的显著性检验为了检验上述回归方程及回归线的可靠性，特对其进行统计学检验。4．2．1F检验F检验是评价线性回归方程显著性的主要方法。在线性回归分析的条件下，总的偏差平方和Q的自由度为，

7、．，=n一1，其中n为用来拟合回归方程的试验点数；回归平方和Q。的自由度^=1，残要釜i到型曼i萼；善薹妻i。；；一竿

8、鼍杰坦i二i菖誉蠢!；％i√～誊ili呈；一甚；譬一El；、悬浮剂；对高温、酸碱稳定，可作稳定剂，适合广泛的食品加工要求；可作为乳化剂用于色拉、肉汁调味料的生产；curvielan的胶凝作用使其在布丁、糕点、糖果、口香糖等食品中作为优良的胶凝剂。其极好的弹性还能赋予食品新的质感。大多数半乳葡聚糖具有成腠陛，可用于水果、蔬菜的涂膜保鲜。此外。还可以利用其持水性、冻融性、耐盐性等用于食品的不同领域。综上所述，半乳葡聚糖具有特殊的性能。应用前景

9、广泛，但由于我国微生物胞外多糖产业起步晚，有关半乳葡聚糖的专利均为