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时间:2019-05-12
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1、第七章微生物的生长※典型细菌生长曲线的特点和意义※理化因素对微生物生长的影响※控制微生物生长的理化方法教学重点微生物生长生长、繁殖的概念个体生长微生物生长平衡生长个体繁殖(数量增加)群体生长体积数量大小体积浓度重量浓度重量第一节 微生物纯培养的生长一、微生物的个体生长单细胞微生物个体的生长表现为细胞物质的合成和细胞体积的增加,生长到一定时期就分裂为两个细胞。多细胞微生物的个体生长反映在细胞数目和细胞内物质含量的增加。微生物生长复制基因5’3’细胞膜间体A5’3’B5’3’CDNA运动的方向5’3’5’3’D3’5’5’3’图6-5滚环复制模型(一)细菌细胞的
2、生长:细胞体积增大、原生质量增加、细胞结构组建。1.细菌染色体的复制微生物生长A新合成的细胞壁B新合成的细胞壁细菌细胞壁的扩增A.革兰氏阳性细菌细胞壁的生长B.革兰氏阴性细菌细胞壁的生长2.细胞壁和细胞膜的扩增微生物生长4.细胞分裂细菌细胞生长到一定程度,细胞中间部位细胞膜和壁出现凹陷,横隔壁向心生长,最终在中心会合,形成两个子细胞,完成一次分裂。3.核糖体的建成核糖体重建包括rRNA合成、蛋白质合成及蛋白质在rRNA上的装配3个过程。目前对大肠杆菌核糖体的建成了解比较清楚。每个大肠杆菌约含10000个核糖体。微生物生长0102030405060代时/min
3、60504030图6-8大肠杆菌染色体复制和细菌分裂之间的关系1.短线代表打开伸直的染色体;2.线上圆圈代表复制起点;3.线分叉长短代表复制过程微生物生长芽殖:不等分裂裂殖:均等分裂(三)丝状真菌菌丝的生长丝状真菌营养菌丝的生长主要以极性的顶端生长的方式行。(二)酵母菌细胞的生长微生物生长二、微生物的同步生长(一)选择法1.离心分离法2.过滤分离法3.膜洗脱法同步培养方法A.膜洗脱法;B.离心分离法将不同步的菌液倒入滤器翻转滤膜倒入新鲜培养基新分裂的细胞被洗脱收集短时期内的洗脱液A10%30%蔗糖梯度不同步菌群体离心后收集各部分B用小细胞接种到新鲜培养基中小
4、细胞沉淀慢微生物生长1.控制温度2.控制培养基成分(三)细菌的同步生长与非同步生长非同步细胞分裂同步细胞分裂时间细胞数的对数细菌的同步生长与非同步生长(二)诱导法微生物生长三、微生物的群体生长(一)单细胞微生物的群体生长1.群体生长的测定方法计繁殖数测生长量直接间接直接间接比例计数法血球计数板法液体稀释法平板菌落计数法测量体积称干重比浊法生理指标法微生物生长2.细菌群体生长曲线(1)概念:以细菌数量的对数或生长速率为纵坐标,以生长时间为横坐标,绘制成的曲线称为细菌的繁殖曲线。单细胞的细菌以菌数增加作为群体生长指标,所以又称生长曲线。菌种:纯种、单细胞少量培养
5、基:液体、恒容积其他合适:浓度、温度等生长曲线纵坐标:lg/ml横坐标:时间形式:一条曲线条件微生物生长(2)分期:延迟期、对数期、稳定期、衰亡期微生物的典型生长曲线Ⅰ.延迟期Ⅱ.对数期Ⅲ.稳定期Ⅳ.衰亡期总菌数活菌数ⅡⅢⅣ培养时间/h1g细胞数/个.mL-1(-)0(+)生长速度Ⅰ微生物生长①延迟期特点a.生长速率为0b.细胞体积增大c.原生质嗜碱性提高d.诱导酶活力强e.对不良条件敏感(高温、药物等)影响因素菌种差异种龄接种量培养基性质来自对数期来自延迟期微生物生长②对数期:几何级数增加特点a.生长速度最大b.细胞平衡增长,各成分均匀c.酶系活跃,代谢旺
6、盛三个参数:x2=x1.2n以对数表示:lgx2=lgx1+nlg2∴n=lgx2-lgx1lg2=3.322(lgx2-lgx1)(1)繁殖代数(n)(2)生长速率常数(R)R=nt2-t1=3.322(lgx2-lgx1)t2-t1(3)代时(G)G=1R=3.322(lgx2-lgx1)t2-t1t1t2培养时间/h1g细胞数/个.mL-1x2x1微生物生长影响代时的因素1.菌种2.营养成分3.营养物浓度:可影响生长速率和生长总量。4.培养温度微生物生长温度代时/min温度代时/min108603522151204017.520904520254047
7、.5773029Ecoli不同温度下的代时③稳定期特点a.生长速率为0b.细胞产量最高c.贮藏物增高d.芽孢菌开始形成芽孢e.有些菌产生次生代谢产物影响因素a.养料消耗b.要素比例不合适c.产生有害代谢产物d.物化条件不适合微生物生长④衰亡期特点a.生长速率为负值b.衰退型细胞增多c.自溶现象d.产芽孢菌大量形成芽孢,次生代谢产物增多影响因素:外界环境越来越不利,使细胞内分解代谢大大超过合成代谢。(3)意义微生物生长(二)丝状微生物的群体生长(放线菌,真菌)15010050012345678时间/d腐皮镰孢菌通气液体培养的生长曲线微生物生长(三)连续培养(c
8、ontinuouscultivation)概念:在培
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