《微生物生长》课件

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1、第六章微生物的生长Chapter6microbialgrowthYelimin2021/7/22生物个体由小到大的增长，即表现为细胞组分与结构在量方面的增加生长growth指生物个体数目的增加繁殖repro-duction在单细胞微生物中，生长繁殖的速度很快，而且两者始终交替进行，个体生长与繁殖的界限难以划清，因此实际上常群体生长作为衡量微生物生长的指标。群体生长的实质是包含着个体细胞生长与繁殖交替进行的过程2021/7/22本章目录第一节微生物纯培养的生长第二节理化因素对微生物生长的影响第三节微生物生长的控制2021/7/22平板划线法稀释倒平

2、皿法单细胞挑取法选择培养基分离法第一节微生物纯培养的生长一　纯培养的分离方法2021/7/221.平板划线法2021/7/222021/7/222021/7/222021/7/222021/7/222.稀释倒平皿法2021/7/222021/7/22采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞进行培养以获得纯培养。在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作，挑取单孢子或单细胞进行培养。也可以采用极细的毛细管在载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来，然后移到合适的培养基进行培养。3.单细胞分离法2021/7/22各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生

3、素等具有不同的抵抗能力，利用这些特性可配制合适某种微生物而限制其它微生物生长的选择培养基，用它来培养微生物以获得纯培养。4.选择培养基分离法2021/7/22微生物纯培养分离方法的比较分离方法应用范围平板划线法方法简便，多用于分离细菌稀释倒平皿法即可定性，又可定量，用途广泛单细胞挑取法局限于高度专业化的科学研究选择培养基分离法适用于分离某些生理类型较特殊2021/7/22平板菌落计数法直接计数法薄膜过滤计数法比　浊　法称　重　法生理指标法二　微生物的群体生长（一）微生物群体生长测量方法2021/7/22这类方法是利用特定的细菌计数板或血细胞计数板

4、，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察；每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400×l000×稀释倍数1直接计数法2021/7/222021/7/222021/7/22此法又称活菌计数法，其原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。每毫升原菌液活菌数＝同一稀释度三个以上重复平皿菌落平均数×稀释倍数２．平板菌落计数法2021/7/222021/7/22３．薄膜过滤计数法常用微孔薄膜过滤法测定空气和水中的微生

5、物数量。2021/7/22此法适用于测定量大、含菌浓度很低的流体样品，如水、空气等。2021/7/224．比浊法为测定菌悬液中细胞数的快速方法。原理是悬液中细胞浓度与混浊度成正比，与透光度成反比，可用分光光度计测定光密度，对照标准曲线求出菌液浓度。此法适用于菌液浓度在107个/ml以上、无杂物、颜色较浅的样品。2021/7/222021/7/22通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算微生物群体的生物量；此法的原理是根据每个细胞有一定的重量而设计的。5.称重法2021/7/22蛋白质总量蛋白质总量＝含氮量×6.25细胞总量＝蛋白质总量÷(50%～

6、80%(或65%))≈蛋白质总量×1.54DNA含量核酸DNA是微生物的重要遗传物质，每个细菌的DNA含量相当恒定，平均为8.4×10-5ng.细菌细胞的干重约为湿重的20~25%。2021/7/22样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显，因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。常用于对微生物的快速鉴定与检测微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、生物热等与其群体的规模成正相关。6.生理指标测定法2021/7/22在不补充营养物质或移去培养物，保持整个培养液体积不变条件下，以时间为横坐标，以菌数为纵坐标

7、，根据不同培养时间时细菌数量的变化，可以作出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。生长曲线growthcurve（二）细菌群体生长规律2021/7/22生长曲线可分：延滞期lagphase对数期logphase衰亡期declinephase稳定期stationaryphase2021/7/22将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加，或增加很少，生长速度接近于零。也称延迟期、适应期、调整期。延迟期的特点：分裂迟缓、代谢活跃、细胞体积增长快、细胞质均匀、细胞中蛋白质和RNA含量高，对不良环境抵抗力降低，容易产生各种诱导酶等

8、。1.延滞期lagphase2021/7/22在工业发酵和科研中通常采取一定的措施缩短延滞期：①通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩