家蝇幼虫抗菌蛋白对子宫内膜癌细胞生长影响

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1、家蝇幼虫抗菌蛋白对子宫内膜癌细胞生长影响*【摘要】目的探讨家蝇幼虫抗菌蛋白对子宫内膜癌细胞(JEC)的影响。方法细胞计数法、四甲基偶氨噻唑蓝(MTT)法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对JEC细胞生长的影响；MTT法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对正常人牙周膜细胞生长的影响；苏木素一伊红(HE)染色法观察细胞凋亡，并计算细胞凋亡指数(AI)。结果高浓度组JEC细胞数及吸光度(A)值明显降低，细胞增殖抑制率随浓度的增加而增大；各浓度组正常人牙周膜细胞的A值和细胞增殖抑制率与对照组比较差异均无统计学意义；HE染色见细胞凋亡，各浓度组AI均明显高于

2、对照组。结论家蝇幼虫抗菌蛋白可能是通过诱导细胞凋亡来抑制JEC细胞生长。【关键词】家蝇幼虫抗菌蛋白子宫内膜癌细胞(JEC)EffectofantibactrialproteinsfromtheMuscadometicalarvaeonthegrowthofJECHELifang,WANQihui,LIUHui,etal.DepartementofParasitology,ZunyiMediicalCollege(Zunyi563003,China)Abstract：ObjectiveToexploretheeffec

3、tofantibactrialproteinsfromtheMuscadomesticalarvaeontheJEC.MethodsTheeffectoftheantibactrialproteinsfromtheMuscadotestlcalarvaeonthegowthoftheJECwereobservedbycytometry,MTTassay,anditseffectonthegrowthofperiodontalmembranecellofhumanwereobservedbyMTTassay.Themorp

4、hologyofapoptosiscellswasobservedwithhematoxylin-eosinstainings,andtheapoptosisindex(AI)wasmeasured.ResultsAthigh-concentrationgroups,thecellnumberandtheopticaldensity(OD)ofJECweresignificantlydecreasedandwiththeincreaseoftheconcentration,theinhibitoryrateofthece

5、llproliferationwasincreased.TheODandtheinhibitoryrateofthecellproliferationattheall-concentrationgroupshadnosignificantdifferencecomparedwiththecoatrolgroupintheperiodontalmembranecellofhuman.Comparedwithcontrolgroup,theapoptosisindex(AI)weresignificanltlyincreas

6、edinallconcentrationgroups.ConclusionTheantibactrialproteinsfromtheMuscadomestica.larvaemaybeinhibitedthegrowthofJECbyinducingtheapoptosisofcell.Keywords：mordsMuscadomesticalarva;theantibactrialproteins;JEC研究表明，昆虫抗菌物质能特异性地抑制某些肿瘤细胞生长〔1〕，而对正常人体细胞无不良影响〔2〕。但其抗肿瘤作用机制仍

7、未完全清楚。本研究利用家蝇幼虫抗菌蛋白作用于子宫内膜癌细胞(JEC)，探讨家蝇幼虫抗菌蛋白抗肿瘤作用机制，为开发利用昆虫资源进行肿瘤治疗提供实验依据。1材料与方法1.1主要材料及试剂子宫内膜癌细胞(JEC)；牙周膜细胞。RPMI-1640和胎牛血清(DMEM)培养基(美国Sigma公司)；四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)(美国AMRESCO公司)；酶标仪(美国ELX-800及DJ302A)。1.2家蝇幼虫抗菌蛋白的诱导、提取及无菌处理取家蝇三龄幼虫数百条热诱导(65℃，1min，室温放置10min，重复3次)，然后于65℃，5

8、min，室温放置1h。80℃热水快速烫死，制备组织匀浆(在2％的2-巯基乙醇中)，100℃水浴5min，4℃10000r/min，离心30min，取上清抽滤除菌，-20℃保存备用。1.3实验分组实验组(家蝇幼虫抗菌蛋白组)分0.02％，0.1％，0.5％，2.5％及12.5％组。对照组为等量培养基，各组设4个平行孔。