桑椹黄酮的制备及其降血糖和降尿酸作用研究

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1、王篮超硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名职称单位备注周秀佳教授上海中医药大学博导，主席孙心德教授华东师范大学博导许煜泉教授上海交通大学博导秦路平教授第二军医大学博导朱瑞良教授华东师范大学博导摘要传统中药桑椹子(FmctllsMoriAlbae)系桑科植物桑的成熟果穗经晾晒干燥而成，药典中桑椹子多以辅药形式出现，其药用价值有待进一步丰富。本文首先就桑椹的主要功能成分含量进行了测量，结果表明，烘至恒重的桑椹中黄酮含量为0．56％，多酚含量2．26％，花青素含量0．086％，多糖类含量8．62％。采用高效液相色谱法测定了水解后的桑椹甲醇提取液中黄酮类化合物的种类和含量，结果显示

2、：桑椹中槲皮素含量为(1．506士0．022)m∥g，山柰素含量(0．280士O．007)m∥g。论文确定了桑椹中黄酮类物质的提取方法：桑椹烘至恒重，粉碎过60目筛，石油醚脱脂，乙醇提取合并提取液，减压回收乙醇，热水复溶，待冷却后乙酸乙酯萃取至乙酸乙酯层颜色较浅为止，合并萃取液，减压回收乙酸乙酯，得到桑椹粗黄酮(EnlylaCetateEx仃actofMulbe叫，EEM)。EEM体外生物学活性研究中，通过对DPPH自由基、羟基自由基和亚硝酸盐的清除作用以及对亚硝胺合成的阻断作用，评价其抗氧化活性；通过旺．葡萄糖苷酶体外抑制试验探索了既M对大鼠小肠旺．葡萄糖苷酶的抑制作用

3、；通过黄嘌呤氧化酶体外抑制试验探讨了EEM对大鼠肝脏黄嘌呤氧化酶的活性影响。结果表明，EEM清除DPPH自由基的能力较弱，但清除羟自由基和亚硝酸盐的能力较强，并能有效阻断亚硝胺的合成。EEM具有较好的抑制大鼠小肠0【．葡萄糖苷酶活性作用，半数抑制浓度约12．50m∥mL。同时EEM对大鼠肝脏黄嘌呤氧化酶活性也有较好的抑制作用。体外活性实验表明，EEM具有较好的抑制大鼠小肠a．葡萄糖苷酶活性作用，提示EEM可能具有一定的血糖调节功能。考察了EEM对STZ诱导的高血糖模型大鼠的影响，以loomg／l(g、200mg瓜g、300mg／l(g体重剂量的EEM连续灌胃3w，每周测定

4、血糖，第3w处死大鼠，测定相关指标。灌胃第12d，进行糖耐量实验。结果表明，EEM可显著缓解高血糖大鼠体重下降，有效降低大鼠血清葡萄糖和果糖胺水平，同时OGTT实验表明300m鲋蟾EEM能够有效改善糖尿病大鼠口服糖耐量异常。基于前期体外活性实验结果，EEM具有较好抑制黄嘌呤氧化酶活性，本研究进一步探讨了EEM对高尿酸血症模型小鼠影响。结果显示loomg／l(卧200mg／l(g、300m刚蟾体重剂量三个剂量的EEM均可显著降低高尿酸血症大鼠的尿酸水平。同时EEM可以显著降低大鼠血清尿素氮和肌酐的水平，表明EEM具有较好的保护肾脏作用。此外，EEM可显著降低高尿酸大鼠异常升

5、高的血清甘油三酯和摘要游离脂肪酸水平，显示出EEM对高尿酸模型大鼠的血脂水平具有较好的调节作用。大鼠肾脏的电镜观察结果显示，较之正常组，模型组与AP组肾脏细胞明显畸形化，且细胞核不清晰、核孔模糊，线粒体数量减少。而EEM各个治疗组则情况显著改善，进一步验证了髓M对肾脏具有一定的保护作用。而后着重探讨了桑椹黄酮的提取制备工艺，并绘制了桑椹黄酮(Mulbe叫FlaVonoid’MFV)制备设备工艺流程图，初步分析了制备过程中的主要能耗。并对经实验室纯化得出的ⅪV进行体外活性实验。结果表明ⅧV和EEM功能相似，均具有较好的体外抗氧化活性并能显著抑制a．葡萄糖苷酶与黄嘌呤氧化酶活

6、性。综上，水解后的桑椹黄酮中主要黄酮苷为槲皮素与山柰素，且EEM和mV均具有显著的体外抗氧化活性和对a．葡萄糖苷酶与黄嘌呤氧化酶活性抑制作用。EEM可以显著降低高血糖大鼠血糖水平，同时EEM可以降低高尿酸血症大鼠尿酸水平，并对腺嘌呤诱导的高尿酸血症大鼠肾受伤有积极的防治作用。关键字：桑椹；抗氧化；0【．葡萄糖苷酶活性；黄嘌呤氧化酶活性；降血糖作用；高尿酸血症Abst隔ctAbstI。actFmctusMoriAlb∞，oneofmeTraditionalChineseMedicineismadebymanJl℃f．mitsofmulbeHy．Accordillgtothe

7、Ph锄acopoe斌FmctusMoriAlb∽isusuallyused觞锄刎uV锄t觚ditsmedicinalValueneedst0bef．urnlerenriched．FirsttheVariousfhnctionalcomponentSofmulber拶wereanal)，zed粕dmeresultsshowed也atmecontelltsoftotalnaVonoicts，polypHenols，卸thocy锄inPigment狮dpolysaccharidesacCo帅tedfor0．56％d眄wei曲t，2．