自体颌下腺游离移植治疗严重干眼的实验及临床研究

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1、中山大学博士学位论文自体颌下腺游离移植治疗严重干眼的实验及临床研究姓名：沙翔垠申请学位级别：博士专业：眼科学指导教师：陈家祺2003.5.5中山大学2000级博士论文中英文摘要自体颌下腺游离移植治疗严重干眼的实验及临床研究专业：眼科学临床医学博士研究生：沙翔垠指导教师：陈家祺教授摘要，f因外伤、自身免疫等因素引起的严重干眼是一种灾难性的眼病，泪液分泌极度减少，眼表破坏严重，常用的人工泪液等替代疗法，因其成分与正常泪液相差甚远，只能改善眼干症状，不能阻止眼表的恶化，多数患者最终因角膜溃疡、角膜混浊而丧失视力甚至眼

2、球。此外，严重干眼患者为了缓解眼千症状需频繁地滴用人工泪液，长期使用本身即是一种痛苦。而人工泪液中的防腐剂和赋形剂等添加剂也会对眼表造成损伤。因此寻找一种人体自身分泌的、与泪液成分相近的体液代替泪液是人们长期以来寻求的治疗严重干眼的理想方法。腮腺管移植即是人们在这方面的一种探索，但由于其术后进食时反射性的大量溢泪，以及腮腺分泌液为单纯浆液性，不含对泪膜形成较重要的粘蛋白成分，使人们最终失去了对这一手术的热情。基于寻找到一种混合型的浆液粘液分泌物导致了将自体颌下腺移于颞窝的想法的产生，采用显微吻合血管技术，同时将

3、领下腺导管吻合于外上穹窿结膜。初步的报道显示其对严重干眼较好的治疗效果，但该手术问世时间不久，手术相对复杂，国内外先后仅有4位作者报道该手术，而且例数较少，涉及的仅仅是移植腺体的存活与否以及术后泪液分泌的多少、患者自觉症状的改善、人工泪液的使用情况等一般的临床指标，缺乏对眼表改变客观指标全面的观察及术后泪液主要成分的分析，同时也缺乏相关的基础研究及显微技术的探讨。)本研究即通过动物实验、细胞培养及临床研究，系统探讨自体颌下腺游离移植的手术技巧、移植后腺体结构、功能的改变及细胞生物学特性的变化，并从细胞和蛋白水平

4、阐述移植后泪液的主要成分及其对眼表结构、眼表细胞生物学特性的影响等。／1．实验研究部分目的：探讨自体颌下腺游离移植的手术技巧、移植后腺体结构和功能的改变及其细胞生物学特性的变化、移植后泪液的分泌及其对眼表结构、眼表细胞生物学特性的中山大学2000级博士论文中英文摘要影响。方法：(1)制作干眼模型，应用显微吻合血管技术将游离的颌下腺移植于眶颞区，导管吻合于外下穹窿结膜。(2)通过泪液分泌试验、眼表活体染色、SDS．PAGE蛋白电泳、生化测定、免疫组化、病理及电镜技术等观察术后泪液的分泌、泪液蛋白成分及淀粉酶含量、

5、移植腺体组织结构及眼表变化。(3)通过细胞培养、流式细胞仪、MTT、免疫组化等技术分析移植颌下腺细胞的生物学特性及其细胞培养上清液对眼表上皮细胞的生物学特性的影响。结果：(1)4例因血管处理不当而致颌下腺移植失败，其中1例因误扎颈外静脉颌下腺引流分支，l例因吻合口出血再次阻断血流吻合后动脉血栓形成，另2例为静脉血栓形成；移植成功且观察时间在2个月以上者有lO例，9例移植颁下腺存活，具有正常的组织结构。电镜及S．100染色可见神经节及神经纤维。另有l例移植颌下腺萎缩、纤维化。移植组的角膜和结膜组织具有正常或接近正

6、常的组织结构，而干眼对照组有中到重度的炎症细胞浸润。扫描电镜观察干跟模型对照组的角膜结膜细胞表面丧失了正常的微绒毛结构，细胞间桥粒连接断裂。而颌下腺移植组角膜上皮细胞的微绒毛结构及细胞间连接基本正常。(2)移植组兔的泪液分泌由术前的11．35±2．04ram增加至术后的21．68_4-8．02mm(p

7、生角膜溃疡，角膜活体染色评分为：荧光素2．3±2．26，虎红1．76±1．72，而干眼模型对照组则有7例出现角膜溃疡，相应角膜活体染色评分分别为7．5±1．65，5．3±1．49，两组间的差异均有显著性(p

8、清液作用最明显。当其浓度达20％时，这一作用下降。2．临床研究部分目的：(1)探讨自体颌下腺游离移植的临床手术技巧；(2)观察颌下腺移植术后泪液的分泌规律、主要成分及其对严重干眼眼表的治疗效果。n中山大学2000级博：E论文中英文摘要方法：(1)通过显微外科技术将自体颌下腺游离移植于颓区，导管吻合于外上穹窿结膜。(2)锝朔核素扫描、泪液分泌试验、淀粉酶含量测定判断移植腺体的存活及分泌功