喜树、丹参组织细胞培养的研究

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1、陕西师范大学硕士学位论文喜树、丹参组织细胞培养的研究姓名：田宇红申请学位级别：硕士专业：植物学指导教师：王喆之2003.5.1喜树、丹参组织细胞培养的研究田字红摘要喜树(Camptotheca丑cⅢ，∞faDecne)是珙桐科旱莲属植物．含有抗肿瘤作用的活性成分喜树碱。丹参(SaIvia肌，tiorrhizaBge)是唇形科鼠尾草属植物，是一种治疗心血管系统疾病的重要中草药。分别以喜树、丹参为材料，系统研究其组织细胞培养技术，建立其相应的植株再生系统和细胞培养物繁殖体系，并从其培养物中提取有效成分，无论是对

2、应用生物技术繁育喜树、丹参优良种苗，还是利用细胞培养生产有效活性成分均具有一定的意义。本实验的主要结果如下：1．系统研究了以喜树项芽、子叶、胚轴为外植体诱导愈伤组织的培养方法和以顶芽为外植体快速繁殖喜树的方法，获得了大量的愈伤组织和丛生芽。f实验结果表明在MS附加2，4一D2．Omg／L、BAI．Omg／L、NAAO．5mg／L的培养基上，子叶愈伤组织的诱导率为87．9％、胚轴的诱导率为82．9％、顶芽的诱导率为6．7％。在附加2，4～D与BA组合的培养基上诱导愈伤组织的效果好，其中在MS附加2．4一D2．

3、Omg／b、BAI．Omg／L的培养基上子叶和胚轴的诱导率都为85％以上，诱导的愈伤组织质地疏松，淡绿色略微带红。在附加NAA与BA组合的培养基上，愈伤组织诱导率低，诱导出的愈伤组织颜色为绿色，质地致密。芽增殖的较佳培养基为MS附加ZTI．Omg／L、NAAO．Img／L。试管苗生根的较佳培养基为MS附加0．Olmg／L的IBA或IAA，生根率可达50％。、1f}{、f2．通过不同种类和浓度激素对喜树愈伤组织中喜树碱积累的研究发现，在以MS为基本培养基，附加2，4一DO．5mg／L、BAI．Omg／L和2，

4、4一D1．Omg／L、BAI．Omg／L时，．仅有少量喜树碱积累，当2，4一D浓度增大至2．Om∥L时，有较多的喜树碱积累：褐化的愈伤组织中喜树碱的含量高于绿色愈伤组织中喜树碱的含量，褐化的愈伤组织中喜树碱的含量达0．8270Ao，接近原植物嫩叶中喜树碱的含量(0．92790)．远远高于原植物老叶(0．067‰)和种皮(O．2200％o)中喜树碱的含量，也高于原植物中喜树碱的平均含量。／舂谚系统研究了丹参茎段、叶片和花药外植体的培养方法和植株再生技术，获得了大量的试管苗。似惦为基本培养基，附加2，4一D(o

5、．5—2．0)mg／L、BAI．Omg／L适于茎段、叶片诱导愈伤组织，诱导率为100％；附加BA(110—2．o)mg／L、NAAO．img／L适于茎段、叶片诱导芽和芽的增殖，诱导率为100％；附加IAA、IBA或NAAO．Img／b或者I／2MS适于根的诱导，诱导率为100％。丹参花药在MS附加BAI．Omg／L、NAAO．Img／L的培养基上可产生愈伤组织，进而产生不定芽。^；／W通过对陕西省安康地区所栽培的12种不同形态丹参的脂溶性成分含量的测定得出：安丹II号脂溶性成分含量最高，其中丹参酮II．含量

6、为0．7085％、隐丹参酮含量为0．i951％、丹参酮I含量为O．0076％。为选育优良的丹参栽培品种，更好地开发利用丹参药用资源奠定了基础。，5．通过不同种类和浓度激素对丹参愈伤组织中丹参脂溶性成分积累的研究得出?以培养的丹参叶片、茎、根为外植体诱导的丹参愈伤组织中丹参脂溶性成分含量比较低，而在以MS为培养基，附加2，4-D3．Omg／L、NAAO．5mg／L的培养基上根诱导的愈伤组织中，丹参酮JJ．含量为0，0142％，高于其它愈伤组织中丹参酮lI．的含量。利用丹参愈伤组织生产其有效成分有待进一步研究。

7、上产关键词：喜树丹参组织培养植株再生有效成分测定StudiesontissueandeellcultureofCamptothecaacuminataD．andSalviaMiitiorrhizaB．TianYuhongAbstractCamptolhecaacuminataDecneofNyssaceaecontainsCamptothecin(CPT)一akindofeffectivecomponent，whichisactivetocancer．SalviaMiltiorrhizaBgeofLabia

8、taeisallimportanttraditionalChineseherbaldrugs，especiallyincuringcardiovasculardisease．AsystematicstudyonthetissueandcellcultureofCamptothecaacuminataDecneandSalviaMiltiorrhizaBgeissignificantnotonlyinpropaga