安溪乌龙茶灌木型无性系品种亲缘关系的RAPD分析

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1、福建农业大学硕士学位论文安溪乌龙茶灌木型无性系品种亲缘关系的RAPD分析姓名：黄慧申请学位级别：硕士专业：茶学指导教师：詹梓金2003.4.1摘要以安溪13个乌龙茶品种为材料，利用RAPD法研究了它们的亲缘关系。结果表明：1．茶叶RAPD—PCR最佳扩增条件：在25ul反应体系中加入50ngDNA模板，1．0uTaqDNA聚合酶，2．5mmol几Mg”，0．2mmol／LdNTPs和0．2umol／L引物。94℃预变性40s，94℃变性30s，37℃退火lmin，72℃延伸lmin，经45个循环，72℃延伸10mil3．2．RAPD结果：筛选出的20个有效

2、随机引物扩增出125条带，扩增片段的大小在0．3—3Kb之间。多态性条带为63条，占总量的50．4％。因此，13个安溪乌龙茶灌木型无性系品种的多态性程度并不是很高，表明当地茶树品种基因型具有较大的相似性，其品种之间遗传差异性较小。3．聚类分析结果：聚类结果可将13个品种分为三组，第一组有“墨香”、“本山”、“软枝乌龙”、“绿芽观音”；第二组有“红芽佛手”、“大叶乌龙”；第三组有“圆叶观音”、“长叶观音”。而“杏仁”、“铁观音1”、“绿芽佛手”、“红骨乌龙”、“铁观音2”品种则独立于上述品种。13个品种相似系数介于74—91％之间，平均相似系数为85．16％

3、，遗传距离介于0．0943—0．3011之间，平均遗传距离为0．1607。铁观音1与其它品种平均相似系数为84．33％，最大值为89％，平均遗传距离为0．1702，最小值为0．1165；与绿芽佛手相似系数最小，为78％，低于总的平均相似系数85．16％，其遗传距离为0．2357，高于平均遗传距离0．1607。这表明了铁观音1和绿芽佛手的亲缘关系要远于铁观音1和其它品种的亲缘关系．由远及近依次为绿芽佛手、铁观音2、红骨乌龙、杏仁、墨香、长叶观音、软枝鸟龙、大叶乌龙、绿芽观音、圆叶观音、红芽佛手、本山．关键词：乌龙茶；品种；R．APD；聚类分析；亲缘关系；遗传

4、距离AnassessmentofgeneticrelationshipsbyRAPDinOolongteacultivars(CamelliaSinensis(L)0．Kuntze)fromAnxiAbstract：Inthispaper，13teaplantcultivarswereevaluatedusingRAPDmarkers．Theresultshowed：1．PCRoptimumamplificationofgenomicDNAasfollows：94。Cfor40s：45cyclesof94。Cfor30S，37。Cfor60S，72。Cfo

5、rlrain；72。Cfor10min．111ePeRreactionwasperformedinafinalof25ulcontaining1×Taqpolymerasebuffer．1unitofTaqpolymerase，200uMofeachdNTPs，0．2uMofrandomprimer，2．5mMMgCl2and50ngoftomlgenomicDNA．2．RAPD—PeRusing20randomprimersproducted125readableandreproduciblebinarypaUems(62constant，63varia

6、ble)，andthesizeofamplificationproductsrangedfrom0．3kbtO3．0kb．whichwereusedtocalculatethegeneticdiatancesandtoconstructthedendrogram．Outofthe125bands，63bands(about50．4％)werefoundtobepolymorhphic．Itsuggestedthediversitydetectedamongtheteacultivarswasrelativelylow．3．Theresultsofclust

7、eranalysisrevealedthatthreemajorgroupscouldberecognized．Group1included“Moxiang”，“Benshan'’，“Ruanzhiwulong”and“lvyaguanyin”．Group2comprisedof“Hongyafushou”，“Dayewulong”；Group3included‘'Yuanyeguanyin”，“Changyeguanyin”，However,‘'Xingren”，“Tieguanyin1”，“lvyafushou”．‘‘Hongguwulong’’and

8、“Tieguanyin2’’weredifferentfromab