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1、机械性鼠脑皮层下横切后皮层神经元凋亡作者：高李贵，王卉芳，刘重霄，师蔚【关键词】脑损伤 【Abstract】AIM:Toinvestigatethecharacteristicsofcellapoptosisincortexaftermechanicalwhitematterinjury.METHODS:TwentysixSDratssufferingmechanicalsubcorticaltransectionwerekilledatdifferenttimepointspostinjury,andthebrainswereobtained
2、.ThechangeofcellsinlesionareaandcortexwasobservedbyHEstaining,bufferedmethylenbluestainingandTUNELinsituendlabeling.RESULTS:Histopathologicalexaminationshowedneuronalnecrosisandglialcellproliferationinlesionsite,whilemanyneuronswitheredinthelayerⅡ-Ⅴofthecorrespondingcortex.Ap
3、optoticneuronscouldbedetectedinthecorrespondingcortexasearlyasthe12thhpostinjury.Thenumberincreasedwithtime,peakedduring5th-7thd,andthendeclined.Inthe19thd,theapoptoticneuronsstillcouldbedetectedinthecorrespondingcortex,whilefewapoptoticneuronswerefoundinlesionarea,andthetime
4、waspresentedinasinglewavecurve.CONCLUSION:Themainpathologicalchangeofcorticalneuronsisnotnecrosis,butapoptosisaftermechanicalwhitematterinjury.The6apoptoticneuronsareanatomicallylocatedinthecorrespondingcorticallayerⅡ-Ⅴ. 【Keywords】braininjury;subcorticaltransection;apoptosis
5、 【摘要】目的：探讨在机械性脑白质损伤后皮层神经元凋亡及其分布特征.方法：制作大脑皮层下横切动物模型，于致伤后不同时间处死动物，用TUNEL原位末端标记和病理组织学方法观察损伤区及相应皮层神经元变化规律.结果：致伤后，损伤部神经元出现坏死，胶质细胞增多，大脑Ⅱ~V层神经元多出现萎缩.伤后12h，相应皮层内即出现散在凋亡神经元，后渐增多，7d后又趋减少，伤后19d皮层内仍可检出凋亡神经元，而在损伤区凋亡神经元少见，其时间分布呈一单峰状曲线.结论：脑白质损害时，损伤相应部位皮层神经元主要表现为凋亡，分布于第Ⅱ~V层. 【关键词】脑损伤；皮层下横切
6、；细胞凋亡 0引言 细胞凋亡与神经退行性疾病，缺血性脑损伤以及HIV脑病等多种神经系统疾病密切相关［1,2］.在体研究表明，在颅脑外伤、缺血缺氧性脑损伤以及周围神经轴突切断时均存在中枢神经元凋亡［3］.那么，在脑白质损害时大脑皮层神经元是否亦存在凋亡现象？其时间和空间分布特征如何？目前尚未见报道.我们研究脑白质损伤过程中，相应大脑皮层神经元病理变化规律，从而为临床上脑白质性神经功能障碍的治疗提供新的思路.6 1材料和方法 1.1材料 皮层下横切刀仿Dale法制作［4］，将刀片长度改为3mm.选用体质量240~210g的健康雄性SD大鼠2
7、6只，随机分为假手术组（12只）和模型组（14只）.参照Dale法将耳棒固定于SD大鼠耳前1.0mm，以电动小磨钻开颅，使横切刀与中矢面呈15°夹角，刀片置于大脑皮层上，尖朝后.假手术组至此提出横切刀.模型组定位刀片根部坐标：前囟部中线旁1.0mm，刀片降至皮层下1.4mm，顺时针旋转180°，再返回原位,完成大脑皮层下横切. 1.2方法 两组分别于致伤后0.25,0.5,1,3,5,7,l0,14和19d全身灌注处死动物并取脑.40g/L甲醛固定48h，冠状面切取经损伤区中央的切片3张,厚5μm,石蜡包埋.分别行HE染色，亚甲蓝法尼氏染色和
8、TUNEL法原位末端标记检测.两组分别取上述各时点损伤区中央切片1张，行TUNEL法凋亡细胞检测（试剂来源TdT：Promega公司;D
