阿奇霉素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

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2、研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：j13’’导师签中文摘要阿奇霉素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响摘要目的：本实验拟通过单侧输尿管结扎造成肾间质纤维化的动物模型，利用阿奇霉素进行干预，观察肾间质中单核／巨噬细胞浸润的情况，肾间质纤维化的程度，细胞因子NF．KBp65、MCP．1、TGF．131、胶原III蛋白表达的变化，探讨阿奇霉素对肾间质纤维化的影响。方法：将60只SD大鼠编号后按随机的原则分为三组：正常对照组(假手术组)20只，模型组(单侧输尿管结扎组)20只，治疗组(阿奇霉素组)20只。将各组大鼠以10％水合氯醛(

3、O．3mg／Kg)腹腔注射麻醉，行右背部切口，分离肌肉组织，暴露右肾，沿右肾下极寻找到右输尿管，用4一O号线上下结扎两处，然后从中剪断输尿管以防逆行性感染，假手术组除结扎和剪断输尿管外，完成其他手术过程。假手术组和输尿管结扎组予生理盐水2ml／d灌胃，1次／日；阿奇霉素组以阿奇霉素混悬液80mg·Kg。1·d‘1灌胃，1次／日。三组均于术前一天开始灌胃。单侧输尿管结扎术后分别于第3、7、14天，每组随机取6只处死，留取右侧肾标本，置于4％多烯甲醛固定液固定，二甲苯透明石蜡包埋，制成3um切片。用HE和MASSON染色法观察大鼠肾脏组织病理改变，应用免疫组化方法检测肾小管

4、间质中转化生长因子(TGF．131)、核因子．KBp65(NF．KBp65)、单核细胞趋化因子．1(MCP．1)、胶原III(CollII)的表达情况，对结果进行半定中文摘要量分析。结果：正常对照组肾脏外观正常，肾脏组织红润，无肿大。模型组和治疗组梗阻侧肾脏的体积随梗阻时间的延长而增大，可见肾内积水，肾实质变薄，肾盂扩张，肾盏乳头受压，穹窿部乳头变平，部分成凹形，积液清亮透明，偶可见包膜下有点状瘀血。病理变化：HE染色和Mas0n染色结果显示正常对照组肾小球、小管结构正常，胶原染色主要位于肾小管基底膜(mbularbasemembrane，TBM)、Bowman囊、系膜

5、区和肾小管的毛细血管周围，小管周围肾间质无增宽。HE染色模型组术后3天肾小管扩张不明显，上皮细胞变性、水肿，间质中少量单核细胞与淋巴细胞浸润，模型组术后7天可见肾小管扩张明显，上皮细胞出现坏死，肾间质大量炎症细胞浸润，间质宽度明显增加；模型组术后14天肾小管扩张明显，小管基底膜不同程度断裂，皮质及外髓萎缩的肾小管较多，间质中大量淋巴单核细胞浸润，纤维化较明显。Masson染色可见模型组术后3天出现肾小管扩张，肾间质宽度增加，胶原纤维增加，染色加深；此后，病变逐渐加重。肾间质相对面积术后3天正常组为(1．724-0．41)％，模型组为(4．56士1．03)％，治疗组为(3

6、．014-0．98)％，术后7天正常组为(2．23士O．57)％，模型组为(11．58士5．37)％，治疗组为(6．374-4-3．36)％，术后14天正常组为(2．894-0．72)％，模型组为(27．344-8．83)％，治疗组为(10．354-5．57)％，有显著性统计学差异(P

7、．34士0．84)％，(1．47士0．33)％，两组比较有显著性统计学意义(P