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《马铃薯Y病毒衣壳蛋白基因片段长度对RNA介导抗病性的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国科学辑生命科学,马铃薯病毒衣壳蛋白基因片段长度’对介导抗病性的影响朱俊华竺晓平温孚江白庆荣朱常香宋云枝山东农业大学植物保护学院,泰安摘要在已证明转化马铃薯病毒全长衣壳蛋白基因可获得高度抗病的转基因烟草、且这种抗病性为介导抗病性的基础上,克隆了马铃薯病毒坏死株系衣壳蛋白基因’,甩和,,端风的部分基因片段以和并分别构建植物表达载体一,一琳和一利用农杆菌介导方法转化烟草抗病性鉴定表明,转化和基因片段的转基因烟草均可获得抗病程度达到免疫的植株,而转化的基因片段没有获得抗病植株分子分析结果表明这种抗病性为介导的抗病性,是转录后基因沉默的结果研究表明,能够诱发介
2、导抗病性所需的一墓因的最短有效片段长度可能介于和之间这一研究结果对改进利用转录后基因沉默策略来防治植物病毒病害以及研究转录后基因沉默机制具有意义关键词基因部分片段转基因烟草介导抗病性转录后基因沉默马铃薯病毒,是在世界范多胡关于植物病毒基因介导的抗病机制有许多围内引起马铃薯、烟草等重要经济作物的病害,每年研究,最初人们认为这种抗病性发生在蛋白质水平均造成严重的经济损失目前利用抗病毒基因工程上,但后来绝大多数研究表明这种抗病性是发生在培育抗病植株是一条极具潜力的防治植物病毒病害水平上,即介导的抗病性目前已证明,一的途径在植物抗病毒基因工程中由于自然界中抗介导
3、的抗病性与转录后基因沉默源基因缺乏,因而常用的策略是通过转化植物病毒,密切相关,,,,本身编码的基因从而获得抗相应病毒的植株即源在利用介导的对植物病毒的抗性研究中,于病原物获得的抗病性一,绝大多数都是将编码某一蛋白质的完整基因导入植,其中以转化衣壳蛋白基因做的工作最株中,也有将编码某一蛋白质的部分基因片段导入一一,一一收稿收修改稿、国家自然科学基金批准号山东省自然科学基金批准号和山东省科学技术发展计划批准号资助项目,联系人,一中国科学辑生命科学,马铃薯病毒衣壳蛋白基因片段长度’对介导抗病性的影响朱俊华竺晓平温孚江白庆荣朱常香宋云枝山东农业大学植物保护学院
4、,泰安摘要在已证明转化马铃薯病毒全长衣壳蛋白基因可获得高度抗病的转基因烟草、且这种抗病性为介导抗病性的基础上,克隆了马铃薯病毒坏死株系衣壳蛋白基因’,甩和,,端风的部分基因片段以和并分别构建植物表达载体一,一琳和一利用农杆菌介导方法转化烟草抗病性鉴定表明,转化和基因片段的转基因烟草均可获得抗病程度达到免疫的植株,而转化的基因片段没有获得抗病植株分子分析结果表明这种抗病性为介导的抗病性,是转录后基因沉默的结果研究表明,能够诱发介导抗病性所需的一墓因的最短有效片段长度可能介于和之间这一研究结果对改进利用转录后基因沉默策略来防治植物病毒病害以及研究转录后基因沉
5、默机制具有意义关键词基因部分片段转基因烟草介导抗病性转录后基因沉默马铃薯病毒,是在世界范多胡关于植物病毒基因介导的抗病机制有许多围内引起马铃薯、烟草等重要经济作物的病害,每年研究,最初人们认为这种抗病性发生在蛋白质水平均造成严重的经济损失目前利用抗病毒基因工程上,但后来绝大多数研究表明这种抗病性是发生在培育抗病植株是一条极具潜力的防治植物病毒病害水平上,即介导的抗病性目前已证明,一的途径在植物抗病毒基因工程中由于自然界中抗介导的抗病性与转录后基因沉默源基因缺乏,因而常用的策略是通过转化植物病毒,密切相关,,,,本身编码的基因从而获得抗相应病毒的植株即源在
6、利用介导的对植物病毒的抗性研究中,于病原物获得的抗病性一,绝大多数都是将编码某一蛋白质的完整基因导入植,其中以转化衣壳蛋白基因做的工作最株中,也有将编码某一蛋白质的部分基因片段导入一一,一一收稿收修改稿、国家自然科学基金批准号山东省自然科学基金批准号和山东省科学技术发展计划批准号资助项目,联系人,一第期朱俊华等马铃薯病毒衣壳蛋白基因片段长度对介导抗病性的影响,株亡分析参照文献种后周左右所有的非转基因烟草及转的转基因植株的分析选取抗病转基因烟草均表现明脉,继而出现花叶及叶脉坏死、,性表现不同免疫感病的部分转基因植株进行的症状对于转化和的转基因分析法提取的经
7、单烟草其症状表现可分为种类型类型为感病型,一十,,,,切点酶切后碱法转移到尼龙膜℃在接种后周左右可见明脉继而出现花叶及叶脉坏死的症状,与对照完全一致,固定后与探针杂交转基因植株的杂交分析采用检测其病毒含量与对照无明显差异类型为延迟,,,,酸性酚一硫氰酸肌一氯仿提取法提取烟草叶片总发病型同对照相比延迟发病天以上,’,溶解于适当体积的无的一般在接种后一可见系统花叶症状检,测其病毒含量低于同期生长的对照植株类型为水中电泳和分光光度计检测浓度各取林抗病型,或免疫型,在接种后整个生育期具不同抗病性的转基因烟草进行甲醛变性,和琼脂糖电泳分离后,经转移到内均无任何症状
8、产生用几乎检测不到病毒,,,一尼龙膜,℃固定后与探针杂交在接种后天内每天观察并记