补肾中药对青春期大鼠下丘脑生长抑素基因及其蛋白表达的影响

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1、734斋da里n季Un提iv‘J医M学ed版S三2008Sep,35(5)双荧光标记法定量检测Jg户2r在克隆牛组织中的表达蔡霞1’2龙健儿1'36(1上海交通大学医学遗传研究所上海200040}2复旦大学上海医学院医学分子病毒学实验室，3病原生物学系上海200032)【摘要】目的建立克隆牛fg广2rmRNA实时定量PCR的检测方法，并探讨jg户2rmRNA的表达在克隆牛发育中的作用。方法用Trizol抽提正常及克隆牛的脑、肺、心、肝组织RNA，运用本研究建立的实时荧光定量PCR方法检测各组织中fg广2rmR

2、NA的表达情况。结果正常牛各组织中每弘g总RNA中含，g广2rmRNA拷贝数分别为107·39(脑)、10““(肺)、107-25(心)、107·”(肝)。克隆牛中，每／zg总RNA中含Jg广2rmRNA表达水平变化较大。与正常牛相比，克隆牛不同组织中Jg广2rmRNA的表达水平变化较大，在同一克隆牛的不同组织以及不同克隆牛的同一组织中Ig．产2rmRNA的表达水平相差较大。提示在克隆牛不同组织中堙广2rmRNA的表达水平不一。结论Jg，2rmRNA的表达水平与动物的生长发育有一定的关系，jg广2r基因的表达

3、异常可能与胎牛过度肥大和围产期死亡等现象有一定的关系。对克隆牛各组织中jg广2rmRNA的表达的精确定量有助于进一步研究fg广2r基因在动物生长发育中所起的作用。【关键词】堙f-2r；克隆牛；实时荧光定量PCR【中图分类号】R394．8【文献标识码】AQuantitativedetectionoflgf-2rinclonedcattlewithdipl--fluorescentlabelingreal·_timePCRCAIXial¨．LONGJian—erl·3△(‘ShanghaiInstituteofM

4、edicalGenetics，ShanghaiJiaotongUniversity，Shanghai200040，China；2KeyLaboratoryofMedicalMolecularVirology，3DepartmentofMedicalMicrobiologyandParasitology。ShanghaiMedicalCollege，FudanUniversity，Shanghai200032，China)[Abstract]ObjectiveToestablishedamethodofreal

5、—timePCRtoquantizedIgf-2rmRNAinclonedcattleandtodiscussthemechanismofIgf-2rmRNAexpressinclonedcattle．MethodsWeextractedtissues(brain，lung，heart，liver)mRNAofnormalandclonedcattlewithTrizolbyusingthemethodofreal—timefluorescentquantitativePCR(FQ-PCR)。andquant

6、izedlgf-2rmRNAOftissuesinclonedcattle．ResultsInnormalcattle，theIgf-2rmRNAinbrain，lung，heart，liverwere107·”，108·“，107·”，107”copiesper弘g，respectively．InclonedcattlethecopiesofIgf-2rmRNAwerevariable．Comparedwiththenormalcattle，theexpresslevelsofIgf-2rmRNAofdif

7、ferenttissuesinclonedcattlewerevarious．ConclusionsTheexpresslevelofIgf-2rmRNAmayrelativewiththegrowthanddevelopmentofsomeanimals，theabnormalityexpresslevelofIgf-2rmayresultindisproportionalovergrowthandperinataldeathofanimals．PrecisequantitationoftheIgf-2rm

8、RNAinclonedcattlemayconducetostudytheeffectofIg户2rinthegrowthanddevelopmentofanimals．[Keywords]Igf-2r；clonedcattle；real—timefluorescentquantitativePCR克隆技术的发展与应用对动物生产及医药工业等有重要意义，但实施过程中需要对胚胎进行多种国家自然科学基金项