脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠低氧诱导因子-1α的影响

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1、广州叶1医药大学学报2011年11月第28卷第6期624JournalofGuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicineNovember2011，Vo1．28，No．6脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠低氧诱导因子一l仪的影响牛磊，宫洪涛，马云枝，王黎，任力(1．河南职工医学院教务处，河南新郑451191；2．河南中医学院第一附属医院脑病-SK，河南郑州450000)摘要：【目的】通过观察中药复方脑力苏胶囊对血管性痴呆(VD)大鼠海马低氧诱导因子一1(HIF一1)阳性细胞表达的影响，探讨其改善VD犬鼠认知障碍

2、的作用机制。【方法】选用雄性sD大鼠90只，随机分为假手术组，模型组，脑力苏高、低剂量组(卉lj量分别为2．5、1．25g·kg～·d)，喜得镇组(剂量为0．6nag·kg。。·d)；采用双侧颈总动脉结扎法复制VD大鼠模型，采用Morris水迷宫测试法检测VD大鼠学习、记忆改善状况，免疫组化法检测大鼠海马(CAI区)HIF一1仪阳性细胞数。【结果l脑力苏高、低剂量组大鼠学习记忆能力显著改善(P<0．01)，海马HIF一1阳性细胞表达较模型组显著降低(P<0．01)。【结论】脑力苏胶囊治疗VD的作用与其能降低海马HIF一1表达，提高缺血脑组织细胞内氧

3、浓度有关。关键词：脑力苏胶囊／药理学；血管性痴呆／中药疗法；脑缺血／中药疗法；脑／病理学；疾病模型，动物；大鼠中图分类号：R285．5文献标志码：A文章编号：1007—3213(2011)06—0624—04低氧诱导因子一l(HIF一1)是一种由仪和B试剂盒(北京中山生物技术有限公司)，Morris水两个亚单位组成的异源二聚体转录因子，即HIF一迷宫(中国医学科学院药物研究所生产)，动物运1d和HIF一1B，其中HIF一1仅是可调控的功能单位，动轨迹记录分析系统(普升科技有限公司生产)，HIF1B是结构单位¨。脑缺氧缺血后，HIF一1仅的Rcich

4、rt—jungltRCcutB型超薄切片机(日本日立公诱导s~,hi：i是机体对抗缺氧缺血性脑损伤的一种重要司生产)，PM一11AD光学显微镜(日本奥林巴斯公自身保护机制J。本研究通过观察中药复方脑力司生产)，DS一79型托盘天平(武汉自动化工仪表苏胶囊对血管性痴呆(VD)大鼠海马HIF一1OL阳性厂生产)，电热恒温水温箱(上海医疗器械七厂)，细胞表达的影响，探讨其改善VD大鼠认知障碍的低温冰箱(一70％，河南省中医药研究院实验室作用机制，现报道如下。提供)。1．4模型的建立1材料与方法1．4．1动物的筛选大鼠适应性喂养7d后，进1．1实验动物选用

5、健康、雄性SD大鼠，90只，行Morris水迷宫(Morriswatermaze，MWM)测清洁级，12～14月龄，体质量250～380g，由郑州试，淘汰智能低下及有视力障碍的大鼠，5次／d，大学实验动物中心提供(合格汪号：医动字第每次2rain。第3天开始记录逃避潜伏期(即大鼠411261号)。从人水至找到并爬上平台所需要的时间)，一般在1．2实验药物脑力苏胶囊由人参、熟地黄、枸第3天动物逃避潜伏期均在20S以内。如在第5天杞子、灵芝、川芎、胆南星等组成，每lg相当于动物逃避潜伏期仍大于20S则认定为智能低下给予生药2．25g，由河南中医学院一附

6、院制剂室制备；淘汰。喜得镇片剂由天津华津制药厂生产，批号：1．4．2造模方法参照文献[3—4]方法复制慢性070621，用生理盐水配成3．5mg／mL水溶液。脑灌注不足动物模型，大鼠术前12h禁食、4h禁1．3主要试剂与仪器HIF．1仪兔抗大鼠亲合纯化水。用100mg／L水合氯醛3．5mL／kg腹腔注射麻抗体(武汉博士德生物工程有限公司)，免疫组化醉，保证手术期间有自主呼吸。待翻正反射消失但收稿日期：2011—05一l8作者简介：牛磊(1982一)，男，主治医师基金项目：河南省高校科技创新人支持计划资助课题(编号：2008HASTIT007)第6期

7、牛磊，等．脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠低氧诱导因子一1的影响625保留腹式呼吸时，仰卧固定，颈前去毛，酒精消40Dm。滴加兔抗大鼠HIF．1仪亲合纯化抗体，工作毒，沿颈正中切开，分离出双侧颈总动脉(CCA)，浓度为1：200，染色步骤按免疫组化试剂盒说明进套以“1”号线双重丝线结扎(14d)。术中大鼠行，经联苯二胺(DAB)显色，阳性细胞呈棕黄肛温保持在36～37．5，以防止低温对脑缺血色。每组8张切片，每张切片任取5个视野，采用保护作用。控制麻醉深度和体温是造模成功的关图像分析仪测定海马CA1区单位面积HIF一1Ot阳性键。手术后动物送至有通风和空

8、调设备动物房饲细胞数，取平均值。养，保持室温在(20±1)oC。假手术组动物仅行1．7统计方法数据用SPSS10．0统计分