本氏烟类受体激酶基因NBCERKE的克隆及其功能研究

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1、硕士学位论文本氏烟类受体激酶基因NbCERK1的克隆及其功能研究Cloningandfunctionalanalysisofareceptor-likekinaseNbCERK1inNicotianabenthamiana姓名庄培童导师张华建副教授专业植物病理学二O一七年六月致谢在硕士即将接近尾声的时光里,感谢每一位在求学路上遇到的你们,正是因为你们的帮助才使我顺利克服困难,也正是你们的呵护和关爱,让我一步步走到今天。首先要感谢本文的指导老师张华建副教授,正是由于在她的悉心指导和耐心讲解下,顺利的完成了此论文的撰写。从论文选题,实验设计以及最后的论文定稿,都充分体现着张老师的智慧与心血。张老师

2、拥有开阔的眼界,严谨的治学态度,对待生活积极乐观的态度都是我今后学习的榜样。在此谨向张华建副教授致以衷心的感谢和崇高的敬意。还要感谢本实验室高智谋教授在实验及学习中提供的关怀和指导。感谢植保学院的各位老师丁克坚教授、檀根甲教授、江彤教授、潘月敏副教授、郭敏副教授、周秀红老师、伍万荣讲师、盛康辅导员等老师在学习和生活中给予的鼓励和支持。也正是由于你们关怀才让我能感觉到来自于四千公里以外家的感觉。谢谢实验室的师兄师姐师弟师妹们三年来与我一同分享的研究生三年的时光。感谢我的小伙伴王艺烨、赵同瑶、陈玲、宋志强、汤召召、张程、盖迪、姚传春、张金元、刘栓林、魏君君、刘冬、王伟燕、任恒雪、郑婷、吴亚、刘腾飞

3、在实验方面的大力支持和帮助,还要感谢植保院其他课题组小伙伴们的热心帮助,也因为有你们才使得我的研究生生活丰富多彩,积极向上。感谢安徽农业大学14级硕士班的全体同学陪我走过这一段难忘的历程!最后感谢我的父母在我的学习生涯中给予无限支持和包容,在此,对帮助过我的所有同学和老师表示最诚挚的谢意,谢谢你们!庄培童2017年于安徽农业大学I摘要任何生物在地球上生存都会受到病原物的侵袭。植物在被病原物侵染或感知到胁迫因子的时候,会有相应的应答反应。植物如何抵抗病原菌的入侵逐渐成为人们研究的热点。当植物感知病原物侵入时,细胞内的相关分子模式免疫反应被激活,进而对于大多数的病原物都有抗性。而病原物之后会产生效

4、应因子,来干扰植物的PTI,对于植物则会产生R基因去阻止效应因子。病原物效应因子与植物R基因相互作用,相互影响,诱发ETI。激发子可诱发植物抗病性且一般源于生物,如真菌激发子Chitin,细菌激发子flg22等。激发子被寄主识别,通过一系列的信号传递,植物感知到病原菌侵入信号,并作出反应,表现为植物的过敏性反应和气孔关闭。几丁质是一种病原相关分子模式,是病原真菌细胞壁的主要成分,可诱发拟南芥和水稻的免疫反应。拟南芥受体AtCERK1通过形成同二聚体或异二聚体,识别Chitin,进而传递免疫信号;而水稻中,OsCERK1形成异二聚体,接受Chitin信号,使水稻获得抗病性。本实验在本氏烟数据库中

5、寻找与水稻和拟南芥中几丁质受体基因同源性最高的基因,并成功克隆得到1980bp的基因,并命名为NbCERK1。在此基础上,利用载体改基因进行定位分析,发现在细胞膜上有荧光信号存在。利用基因沉默技术成功获得NbCERK1基因特异性沉默植株,发现NbCERK1基因可能通过调节保卫细胞中NO和H2O2的积累来影响几丁质诱导的气孔关闭。此外,通过来源不同的五种效应因子Psojnip,INF1,AVH241,Bax和CRN63的处理,发现NbCERK1的沉默影响Psojnip和INF1诱导产生的HR,并不影响Psojnip,INF1,Avh241诱导产生的HR。NbCERK1沉默植株也可能影响Chiti

6、n诱导的本氏烟对烟草疫霉的抗性。综上,本论文试图从本氏烟的数据库挖掘Chitin类受体基因,探究本氏烟Chitin信号传递机制,比较Chitin被不同植物识别的异同点,丰富激发子的信号传递认识,为植物的抗病育种提供理论基础。关键词:植物防卫反应几丁质受体基因基因沉默病原物IIAbstractAnycreatureonearthwillbehitbypathogens.Whenplantpathogensorperceivedstressfactors,therewillbeacorrespondingresponse.Howplantresistancetopathogeninvasiongr

7、aduallybecomepeopleresearchhotspot.Whentheplantperceivesapathogeninvasion,therelevantmolecularpatternsoftheimmuneresponseinthecellareactivated,whichinturnisresistanttomostofthedisease.Thenextstepofthe

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