猕猴桃多肽的制备工艺及其抗菌活性的研究

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1、分类号：Q8学校代码：10697密级：公开学号：201531647硕士专业学位论文DissertationfortheProfessionalDegreeofMaster猕猴桃多肽的制备工艺及其抗菌活性的研究学科名称：生物工程专业学位类别：工程硕士作者：王蕾指导老师:李多伟副教授西北大学学位评定委员会二○一八年PreparationofKiwifruitPolypeptideanditsAntibacterialActivityAthesissubmittedtoNorthwestUniversityinpartialfulfillmentoftherequirementsforth

2、edegreeofMasterinBioengineeringByWangLeiSupervisor:LiDuoweiProfessorJune2018摘要猕猴桃中有生物活性功能的成分很多，如维生素、蛋白质、多肽等都是有很大的应用价值的。目前对于多肽的生理特性及实际应用的研究，是热点问题，但当前对于猕猴桃多肽的深入研究仍不多见。在本论文中，以采摘的猕猴桃鲜果为研究对象，对其进行了初步且较为全面的成分检测，而论文的重点是猕猴桃多肽的制备及其多肽的抗菌活性研究上，为提高猕猴桃的实际应用价值和多肽的深入研究，提供一定的参考。主要研究结果有：1.利用化学物质的理化性质对猕猴桃果实中的成分进行

3、了初步提取，并检测了其中含有的成分，通过实验表明，在猕猴桃鲜果中检测出了蛋白质、多糖、三萜类、有机酸等成分的存在；2.采用超声水提法，对猕猴桃鲜果中的蛋白质进行了提取工艺的优化研究，实验结果表明：当超声功率为200W，提取温度为50℃，pH值为8.0，提取时间为1h，水料比为15:1时，蛋白提取率可达到55.13％；3.将提取得到的猕猴桃蛋白，作为原材料对其进行酶解，筛选得到最佳水解酶的类型为中性蛋白酶，通过一系列实验对酶解过程进行了优化，得：中性蛋白酶的加酶量为3%，酶解液中底物蛋白含量为16mg/mL，pH值为8.0，在55℃的水浴中，水解5h，得到的多肽含量最高可达62.24%

4、；4.由于酶解得到的多肽液分子量大小不一，所以采用超滤技术对其进行分离，从而获得不同分子量的多肽液。根据实验结果，分子截留量为10000Da超滤膜的最佳超滤条件是超滤时间45min/次、酶解液温度40℃、压力大小0.10MPa、酶解液pH值保持初始值即可，此时超滤效率最大能达到60.41%；而分子量为5000Da超滤膜的超滤时间为75min/次、酶解温度不超过膜耐受温度50℃即可、操作压力为0.10MPa、酶解液pH也维持初始pH值，此时多肽液的超滤效率可高达59.32%；5.通过对多肽液进行分离纯化，得到了两种分子量不同的多肽液，通过检测包括猕猴桃蛋白在内的3种待测抗菌成分的抗菌活

5、性，得出了猕猴桃多肽对于细菌具有较强抗菌活性的结论，其中分子量在5000Da以下的多肽液抗菌活性最强，分子量为5000Da-10000Da的多肽液次之，猕猴桃蛋白几乎没有检测出抗菌活性。关键词：猕猴桃，多肽，酶水解，抗菌活性IIIABSTRACTThekiwifruitcontainsmanybiologicallyactivesubstancesandhasgreatpotentialforapplications.Polypeptideshaveveryimportantintopicofhigherresearchvalue.However,therearefewstudies

6、onkiwifruit’spolypeptides.Inthispaper,apreliminaryandmorecomprehensivestudywasconductedonpickingfreshkiwifruitasaresearchobject,providingacertainreferenceforthefutureimprovementofactualapplicationvalueofkiwifruitandin-depthstudyofpolypeptides.Themainfindingsare:1.Usingthecharacteristicsofchemic

7、alsubstances,thecomponentsofkiwifruitwereinitiallyextracted,analyzedandthenidentified.Theresultantsmaterialswereproteins,polypeptides,polysaccharides,triterpenoids,organicacidsandotherfewcomponentswerealsoinitiallydetectedinkiwifr