GABA-B受体介导的瘦素对禁食小鼠摄食量影响的研究

《GABA-B受体介导的瘦素对禁食小鼠摄食量影响的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：Q426单位代码：10183研究生学号：2015742002密级：公开吉林大学硕士学位论文（学术学位）GABA-B受体介导的瘦素对禁食小鼠摄食量影响的研究GABA-B-mediatedLeptin’sEffectonFoodIntakeinFastedMice作者姓名：葛瞳瞳专业：生物化学与分子生物学研究方向：神经生理学指导教师：崔然吉教授培养单位：第二医院2018年3月中文摘要GABA-B受体介导的瘦素对禁食小鼠摄食量影响的研究摄食行为是人和动物最基本的生理活动之一。过量饮食和能量代谢失衡会引起肥胖等代谢疾病，中枢摄食行为调控异常时则会引起进食障碍等神经

2、系统疾病，为患者及其家庭带来严重危害。瘦素是由白色脂肪细胞分泌的激素，能透过血脑屏障作用于下丘脑摄食调控中枢，起到抑制食欲减少摄食，调节能量代谢的作用。GABA是中枢神经系统中最重要的抑制性神经递质之一，近年来有研究证实下丘脑GABA细胞参与摄食调控，刺激GABA-A和GABA-B受体，具有促进或抑制摄食的作用。而GABA受体及瘦素调节摄食的关系未见有关报道。目的：近年来，有关摄食调节的信号通路及参与调控的分子研究已成为神经生物学界和医学界重要研究课题。本课题以禁食诱导暴食小鼠为模型，从摄食行为药理学，分子生物学和生物化学三个方面，探讨瘦素调控摄食的分子机制，并探

3、讨GABA-B受体在其中的作用，从而揭示摄食行为的调控机制，为防治神经系统疾病及肥胖等代谢病提供理论依据和新药开发的方向。方法：选取40只健康ICR雄性小鼠，按照随机分组原则分为对照组，禁食组，瘦素组，瘦素+baclofen组和baclofen组（n=8）。除对照组外，其他四组小鼠给予禁食16h处理。禁食完毕后，进行baclofen给药，baclofen组和瘦素+baclofen组小鼠分别给予8mg/kgbaclofen腹腔注射，其他各组小鼠腹腔注射同等剂量的生理盐水。30分钟后，进行瘦素给药，瘦素组和瘦素+baclofen组小鼠给予1mg/kg的瘦素腹腔注射，其

4、他各组小鼠给予同等剂量的生理盐水。所有药物注射完毕后，连续测定1.5h时间段的摄食量变化。摄食量测定完毕后，各组随机选取5只小鼠直接断头，收集颈静脉血，用ELISA法测定血清中GABA，瘦素，Insulin和POMC水平变化。同时剥离脑组织中的下丘脑部位，用WesternBlot法测定小鼠下丘脑GAD67，TH，POMC和STAT3表达量的变化。剩余3只小鼠，进行灌流处理，用免疫组织化学染色的方法测定其c-Fos表达量变化。I结果：1.0-0.5h，禁食组较对照组摄食量有显著提升，baclofen组较禁食组摄食量明显降低；0.5-1h，瘦素组较禁食组摄食量显著降低

5、，baclofen能够拮抗瘦素对禁食小鼠摄食量的抑制作用，baclofen组较禁食组摄食量明显降低。2.禁食组较对照组，在下丘脑LH,DM,VMH，PALM，PAMM和AHP的c-Fos表达量较对照组均有显著增加。3.瘦素组较禁食组，在LH，DM，PAMM和AHPc-Fos表达显著减少；baclofen给药后，在DM，VMH，PAMM和AHP核团观察到c-Fos表达量较禁食组显著减少。baclofen能够拮抗瘦素对禁食小鼠下丘脑PAMMc-Fos表达的抑制作用。4.禁食小鼠下丘脑的GAD67的表达量较对照小鼠显著增加；瘦素组的GAD67表达量较禁食组显著降低；此外

6、，baclofen组的GAD67表达量较禁食组也显著下降。5.禁食小鼠下丘脑的TH的表达量较对照组有显著降低。6.禁食小鼠下丘脑的STAT3表达量较对照组显著升高；瘦素组较禁食组显著降低了下丘脑STAT3表达量。7.baclofen组的血浆胰岛素水平显著高于禁食组；baclofen组的血浆POMC水平较禁食组显著升高；禁食组的血浆瘦素水平较对照组显著升高。结论：1.瘦素具有抑制禁食诱导的摄食量增加的作用，baclofen能够拮抗瘦素对摄食的抑制作用。2.baclofen对瘦素摄食调节的拮抗作用可能与下丘脑PAMM的c-Fos表达有关。3.瘦素可能通过减少下丘脑GA

7、D67和STAT3的表达抑制禁食诱导的摄食增加作用。关键词：瘦素，GABA-B受体，下丘脑摄食调节，JAK/STAT3信号通路IIAbstractGABA-B-mediatedLeptin’sEffectonFoodIntakeinFastedMiceFeedingbehaviorisoneofthemostbasicphysiologicalactivitiesofhumansandanimals.Overeatingandenergymetabolismimbalancecaninduceobesityandothermetabolicdiseases.Abn

8、ormal