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时间:2018-04-30
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1、半食量对老年小鼠红细胞中SOD活性的影响〔摘要〕目的观察半食量对老年小鼠红细胞中SOD活性的影响。方法通过对全食量、半食量老年小鼠红细胞中SOD活性的测定。结果发现半食量老年小鼠红细胞中SOD活性明显的增高(P0.05)。结论老年小鼠红细胞中的SOD的活性不是很高,在全食量喂养的情况下,产生的自由基过多,使红细胞中SOD一直处于超负荷状态,长时间就会使该酶的活性降低。半食量产生的自由基相对地较少,SOD不处于满负荷工作,所以活性较高。 〔关键词〕红细胞;超氧化物歧化酶;自由基衰老对每一个生物来说都是要
2、经历的,然而,每个生物其衰老的过程是不同的,同一种生物,其衰老的过程也是不一样的,有的衰老得快,有的衰老的慢。衰老的快慢与体内自由基的堆积有关,自由基的堆积与超氧化物歧化酶(SOD)活性有关〔1〕。为探讨食量对红细胞的SOD活性有无影响,本实验采用了全食量、半食量对老年小鼠的喂养,观察其红细胞中的SOD有无变化〔2〕,并进行比较,现报告如下。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1仪器 FA1004N电子天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂制造);723分光光度计(上海光谱仪器有限公司);DK
3、-8A型电热恒温水浴槽(上海精宏实验设备有限公司);KDC-40低速离心机(科大创新股份有限公司)。 1.1.2动物 老年昆明种小鼠20只,雌雄各半,由四军大动物中心提供,统一用四军大动物中心标准食物喂养。 1.1.3试剂 SOD试剂盒(南京建成生物工程研究所)。 1.2方法 将20只老年昆明种小鼠,雌雄各半,随即分成两组。第一组为正常食量组,自由饮水,第二组为半食量组,即每天供给其正常食量的一半,自由饮水,单笼喂养。30天后采血,肝素作为抗凝剂。对每份抗凝血进行如下操作,取抗凝血50μl,
4、冲入盛有2~4ml生理盐水的离心管中,2000r/min、离心3min。用玻璃吸管吸去上清液,要吸干净,留下沉淀的红细胞。在沉淀的细胞中加入冷双蒸水0.2ml,混匀使红细胞充分溶解。加入95%乙醇0.1ml,振荡30s。加入三氯甲烷0.1ml置旋涡混匀器充分抽提1min。3500r/min,离心8min。取上清液10μl,按程序进行操作,记录结果。 1.3统计学方法 实验结果用均数±标准差(x±s)表示,统计资料用t检验进行组间比较。 2结果不同食量的老年小鼠红细胞中的SOD活力见表1。表1不同食
5、量的老年小鼠红细胞中的SOD活力(略)注:*P0.05,差异有显著性从表1可以看出,半食量组小鼠红细胞中的SOD活力有显著的增加(P0.05)。 3讨论超氧化物歧化酶对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用,此酶能清除超氧阴离子自由基(O-·2),保护细胞免受损伤。机体吸收氧气进行新陈代谢能产生大量含氧元素的自由基,引起不饱和脂酸氧化成超氧化物,形成脂褐素、老年斑,并能使细胞中毒、蛋白质和酶变性,产生DNA突变,诱发肿瘤和降低免疫力,而人体中的超氧化物歧化酶(SOD)能清除和减少这种超氧自由基。从表
6、1可以看出,半食量组小鼠红细胞中的SOD活力有显著的增加(P0.05)。那么,其抗衰老能力明显增强,原因可能是,老年小鼠红细胞中SOD的活性不是很高,在全食量喂养的情况下,机体在进行新陈代谢过程中产生的自由基过多,使红细胞中SOD一直处于超负荷状态,长时间就会使该酶的活性降低。半食量喂养的情况下,机体在进行新陈代谢过程中产生的自由基相对地较少,SOD不处于满负荷工作,所以活性较高。 〔 1材料与方法 1.1材料 1.1.1仪器 FA1004N电子天平(上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂制造);
7、723分光光度计(上海光谱仪器有限公司);DK-8A型电热恒温水浴槽(上海精宏实验设备有限公司);KDC-40低速离心机(科大创新股份有限公司)。 1.1.2动物 老年昆明种小鼠20只,雌雄各半,由四军大动物中心提供,统一用四军大动物中心标准食物喂养。 1.1.3试剂 SOD试剂盒(南京建成生物工程研究所)。 1.2方法 将20只老年昆明种小鼠,雌雄各半,随即分成两组。第一组为正常食量组,自由饮水,第二组为半食量组,即每天供给其正常食量的一半,自由饮水,单笼喂养。30天后采血,肝素作为抗凝剂
8、。对每份抗凝血进行如下操作,取抗凝血50μl,冲入盛有2~4ml生理盐水的离心管中,2000r/min、离心3min。用玻璃吸管吸去上清液,要吸干净,留下沉淀的红细胞。在沉淀的细胞中加入冷双蒸水0.2ml,混匀使红细胞充分溶解。加入95%乙醇0.1ml,振荡30s。加入三氯甲烷0.1ml置旋涡混匀器充分抽提1min。3500r/min,离心8min。取上清液10μl,按程序进行操作,记录结果。 1.3统计学方法 实验结果用均数±标准差(
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