系列抗逆基因转化旱稻的后代鉴定及功能分析

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1、：９４３：中图分类号Ｑ．２密级＿公开ＵＤＣ：５８０学校代码：１００８２一一〇ｆＮＣｔＳＣｌＥＨＥＢＥＩＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ硕士学位论文系列抗逆基因转化旱稻的后代鉴定及功能分析论文作者：孙培亚．指导教师：魏景芳教授副指导教师：刘颖副教授申请学位类别：理学硕士学科、领域：植物学所在单位：生物科学与工程学院答辩日期：２０１８年６月ClassifiedIndex：Q943.2SecrecyRate：PublicizedUDC：580UniversityCode：10082HebeiUni

2、versityofScienceandTechnologyDissertationfortheMasterDegreeIdentificationandFunctionalAnalysisoftheProgeniesofUplandRicetransferrdwithSeriesofResistanceGenesCandidate：SunPeiyaSupervisor:Prof.WeiJingfangAssociateSupervisor：Associate.Prof.LiuYingAcademicDegreeAppliedfor：MasterofScienceSpeciality：Botan

3、yEmployer：SchoolofBiologicalScienceandEngineeringDateofOralExamination:June,2018摘要摘要水稻是人们主要的粮食来源之一，水稻生长期间需水量大，其种植受到了环境及水资源的限制，与之相比旱稻生长周期耗水量很小，但干旱、杂草、盐碱地等问题一直都是影响旱稻生产的重要因素。为解决这些问题，本研究通过转基因技术，将一些抗逆、抗除草剂基因转入旱稻中，采用表型筛选、分子鉴定的手段来获得能够稳定遗传、性状更优良的旱稻品系。本课题以前期试验所获得的82个转PPA、APX和8704转基因旱稻为材料。通过实验室除草剂筛选，PCR鉴定初步筛选

4、出了46个转基因候选纯合株系。对转APX、8704转基因纯合候选株系进行耐盐、抗旱分析，与非转基因材料相比，转基因株系的耐盐、抗旱能力得到提高；对该46个转基因纯合候选株系进行了除草剂极限分析，转基因材料的抗除草剂能力达到了8mg/mL。通过SouthernBlot鉴定分析，对转基因纯合株系进行拷贝数分析，确定单拷贝株系为纯合株系，最后鉴定出4个单拷贝纯合株系，分别是：转APX转基因株系6-42、转PPA转基因株系7-32、7-40、7-46。通过Tail-PCR鉴定，对转APX转基因单拷贝株系6-42进行了外源基因插入位点的分析，确定其外源基因插入位点在5号染色体上。关键词旱稻；转基因；筛选

5、；Southern；Tail-PCRIAbstractAbstractRiceisoneofthemainsourcesofgrainforpeople.Duringtheperiodofgrowth,thewaterrequirementislargeforrice.Thecultivationofriceislimitedbytheenvironmentandwaterresources.Comparedwiththerice,thewaterconsumptionofuplandriceissmaller,butproblems,suchasdrought,weeds,saline-al

6、kaliland,havebeenimportantfactorsaffectingtheproductionofuplandrice.Inordertosolvethoseproblems,somestressresistanceandherbicideresistancegenesweretransferredintouplandrice,thenphenotypicscreeningandmolecularidentificationwereusedtoobtainuplandricelineswithstableinheritanceandbettercharacters.Thepre

7、vioustrialofthisprojecthasobtained82PPA,APX,and8704transgenicuplandrice.ThroughthescreeningoflaboratoryherbicidesandPCRidentification,46transgeniccandidatehomozygouslineswereinitiallyscreenedout.Thesa