番茄保守microRNA的鉴定及抗逆功能分析

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1、硕士学位论文番茄保守microRNA的鉴定及抗逆功能分析IdentificationandStressToleranceAnalysisofConservedmicroRNAsinTomato作者姓名：学科、专业：学号：指导教师：完成日期：銮亟盟量』塾援窒Q!墨生互旦一大连理工大学DalianUniversityofTechnology大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果，也不包含其他已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一

2、同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。学位论文题目：盘垫地塑幽星幽鱼墼嫠丞拦功缸鱼堑作者签名：塞J聋日期：墅坦年—鱼月—L日大连理工大学硕士学位论文摘要mieroRNA(miRNA)是生物体内各种生理过程的一种重要调控因子。目前在植物中已发现了大量miRNA。已探明植物miRNA能参与调控植物对多种生物及非生物胁迫的响应，包括病原菌侵染、高盐胁迫以及干旱胁迫等。番茄作为重要的经济作物和生命科学研究的模式植物，目前有关其中的miRNA，尤其是逆境相关miRNA的研究较少。本研究以番茄miRNA为研究对象，主要得到了以

3、下结果：预测到14条新的保守miRNA和56条相应的靶基因。这些靶基因具有不同功能，分别与代谢、跨膜运输、胁迫响应以及转录调控等相关。经实时定量PCR验证，14条新的miRNA中有10条在番茄中表达，包括miRl57a、miRl57b、miRl70a、miRl70b、miRl70c、miR398、miR828、miR2111、miR2118a和miR2118b。采用实时定量PCR对miRl72和miR398进行表达模式分析，发现两者在茎中的表达量均高于根和叶中；在致病疫霉侵染、盐胁迫、干旱胁迫以及脱落酸(abscisicacid，ABA)处理下，miRl72和miR398均能产生不同模

4、式的应答，说明这两个miRNA可能都参与番茄对生物及非生物胁迫响应的调控过程。为了迸一步研究miRl72和miR398的功能，分别克隆了番茄中的MIRl72和MIR398基因，并构建了相应的植物过表达载体。转化烟草后发现转基因植株中miRl72及miR398的过表达均能不同程度地抑制各自抗逆相关靶基因的表达，说明miRl72和miR398参与抗逆相关基因的调控，它们可能在番茄的抗逆应答过程中起着重要作用。本研究不仅是对番茄中miRNA发现的补充，还为阐明miRNA在番茄对胁迫应答的调控过程中的作用机理提供了依据。关键词：番茄；miRNA；生物信息学；胁迫响应；过表达番茄保守microR

5、NA的鉴定及抗逆功能分析IdentificationandStressToleranceAnalysisofConservedmicroRNAsinTomatoAbstractmicroRNA(miRNA)isallimportantregulatoryfactorinvariousphysiologicalprocessesoforganisms．Atpresent，alargeamountofmiRNAswerediscoveredinplants．ManyofthesemiRNAswereproventobeinvolvedintherespondingregulationofm

6、ultiplestresses，suchaspathogeninfection，saltresponse，droughtresponse，andSOon．Thoughtomatoisanimportanteconomiccropaswellasamodelplant，therewereonlyafewreportsabouttomatomiRNAs．especiallystressrelatedtomatomiRNAs．Thefollowingresultswereobtainedinthisstudy．Ourresearchobtained14noveltomatomiRNAsand

7、56targetgenes．Thesetargetsweremainlyinvolvedinmetabolism，transmembranetransport，stressresponse，andtranscriptionregulation．Usingreal—timePCRverification，tenofthe14miRNAswereproventoexpressintomato，includingmiRl57a，miRl57b，miR