衡水老白干大曲中产酯化酶霉菌的筛选及其特性研究

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1、中图分类号：８１４密级：公开，，ＡＱＵＤＣ：６０２学校代码：１００８２／ＨＥ巳ＥｌＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ硕士学位论文衡水老白干大曲中产酯化酶霉菌的筛选及其特性研究论文作者：宫若楠指导教师：朱文众教授申请学位类别：工学硕士学科、领域：发酵工程所在单位：生物科学与工程学院答辩日期：２０１８年５月河北科技大￥学位论文原创性声明，是本人在导师的指导下：所呈交的学位论文独立进行研究工本人郑重声明，作所取得的成果。对本文的研宄做

2、出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方。式标明除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。：学位论文作者签名：指导教师签名５＾以年３月曰年月日？畔ｙ河北科技大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权河北科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检，可以采用影

3、印索、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。□保密，在年解密后适用本授权书。＿本学位论文属于ｂ本保密。“”（请在以上方框内打Ｖ）：学位论文作者签名：指导教师签名冰丨》年多月曰年＃月曰ｙ＾ClassifiedIndex：Q814SecrecyRate：PublicizedUDC：602UniversityCode：10082HebeiUniversityofScienceandTechnologyDissertationfortheMasterDegreeStudyonScreeningand

4、CharacterizationofEsterifyingMouldsfromHengshuiLaobaiganDaquCandidate：GongRuonanSupervisor:Prof.ZhuWenzhongAcademicDegreeApppliedfor：MasterofEngineeringSpeciality：FermentationEngineeringEmployer：CollegeofBioscienceandEngineeringDateofOralExamination:May,2018摘要白酒是我国特

5、有的一大酒种，自古有“曲为酒之骨”之说，大曲对于白酒呈香呈味具有重要作用，白酒的品质主要取决于白酒中少量脂肪酸乙酯，不同种类及含量的脂肪酸乙酯决定了白酒的不同香型与风格。白酒中的酯类可由白酒中有机酸与乙醇在相关酯化酶的作用下合成。酯化酶是特指可以使呈香前体物质转化为香味物质的一类酶的总称，酯化酶多应用于白酒生产，有提高白酒中酯类含量，进而提升白酒优质率的作用。但在实际生产应用过程中存在酯化酶种类少、增香针对性不强、产酶菌体不稳定等问题。本论文由衡水老白干大曲中筛选产酯化酶霉菌并对其产酯化酶条件进行研究，以期提高产酯化酶霉菌在白

6、酒生产中的应用价值。本文通过透明圈法与酸碱滴定法定性定量测定了衡水老白干大曲对10个碳原子以下有机酸与乙醇反应的酯化力，1g绝干衡水老白干大曲可以分别催化生成乙酸乙酯46.71mg、乳酸乙酯67.48mg、丁酸乙酯64.92mg、戊酸乙酯71.86mg、己酸乙酯101.29mg、庚酸乙酯93.02mg、辛酸乙酯103.73mg、壬酸乙酯113.91mg、癸酸乙酯118.33mg；然后另采用气相色谱法来测定1g绝干大曲可催化生成乙酸乙酯42.1457mg、乳酸乙酯60.8823mg、己酸乙酯91.3957mg与丁酸乙酯58.57

7、62mg；通过比较可知两种测定方法结果相一致。由衡水老白干大曲中筛选得到具酯化力霉菌，并进行形态学研究及分子学鉴定，采用PVC乳化液透明圈法筛选得到具有稳定酯化能力的菌株2株：1号菌与8号菌。经18SrDNA鉴定1号菌株为伞状毛霉（Lichtheimiacorymbifera），8号菌株为卷枝毛霉（Mucorcircinelloides）。两株菌采用小米麸皮培养基进行固态发酵培养时，小米与麸皮的最适比例为1:3，通过正交实验确定1号菌与8号菌菌体生长最适条件。1号菌与8号菌催化乙酸乙酯、乳酸乙酯、丁酸乙酯与己酸乙酯反应最适时间

8、均为66h。1号菌具有最高酯化力时的最适培养条件：酸度0.45，培养基含水量为50%，培养基厚度为10mm，置于36℃下进行固态发酵。8号菌具有最高酯化力时的最适培养条件酸度0.40，培养基含水量为60%，培养基厚度为10mm，置于36℃下进行固态发酵。两株菌采用液态发酵法进