《蛋白质样品的制备》PPT课件

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1、培养基的用途液体培养基：增菌固体培养基：纯化，增菌半固体培养基：动力检测，保种细菌的培养特征包括：在固体培养基上观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同细菌在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性，以此可以对不同细菌加以区别鉴定。因此，细菌培养特性的观察也是细菌检验鉴别中的一项重要内容。细菌个体

2、的生长繁殖细菌一般以简单的二分裂法进行无性繁殖，个别细菌如结核杆菌偶有分枝繁殖的方式。在适宜条件下，多数细菌繁殖速度极快，分裂一次需时仅20～30分钟。球菌可从不同平面分裂，分裂后形成不同方式排列。杆菌则沿横轴分裂。细菌分裂时，菌细胞首先增大，染色体复制。细菌群体生长繁殖规律细菌繁殖速度之快是惊人的。大肠杆菌的代时为20分钟，以此计算，在最佳条件下8小时后，1个细胞可繁殖到200万上，10小时后可超过10亿，24小时后，细菌繁殖的数量可庞大到难以计数据和程度。细菌的人工培养在医学中的应用：诊断；细菌鉴定；生物制品。在工农业生产中的应用：在基因工程中的应用细菌的鉴定形态特征和培

3、养性状：菌体形状与大小、鞭毛、荚膜、芽孢、在固体和液体陪养中的形态特征和色素的产生。生理生化性状：革兰氏染色反应和抗酸染色反应等；细胞壁结构与组分，色素和毒素的生化性状、抗原性、代谢类型、对碳源、氮源和大分子物质的利用能力与分解产物等。细菌的鉴定遗传性状；DNA中G+Cmol％、寡聚核苷酸序列．以及DNA—rRNA杂交的同源性等。测定遗传物质DNA分子中G十C含量的多少，具有属和种一级分类价值，不同的属数值范围是较固定的，但由于有些亲缘关系相近的属的这个数值边缘略有覆盖或重叠，因此这一数值主要用来确认或否定某个菌株是否为该属的成员，如某菌株的G十Cmol％不在本属范围时，即可

4、确认该菌株不是本属的成员。DNA—DNA同源值是整个基因组之间相似性的干均值，它反映细菌全部遗传物质的相似程度，不同水平的DNA同源值，代表不同水平的分类单元，一般认为两个样本的同源值在70％以上时属—个变种或亚种，60％以上为同一“种”，20％一60％为同一“属”，20％以下则为不同的“属”。现代的细菌分类学家强调它们的培养性状、代谢类型、多种生化反应及产物、遗传物质中rRNA序列结构、DNA—DNA杂交以及rRNA和DNA杂交所显示的同源性等等，是在一般生物学性状基础上增加更多的遗传学和生理生化性状的数据，再用聚类分析法按相似度(sm)大小归类，按遗传同源性来区分其归属的

5、“基因种’(Genospecies)，这是客观而标准的方法。过去倾向于在一般生物学性状的基础上，再结合血清学反应，尤其强调寄主范围和致病性等表型性状的差异来确定其归属的“分类种”(taxospecies)。可以肯定,在未来的分类中，两者应更好地结合，逐渐建立一个更符合进化关系和亲缘关系的分类系统。分子生物学方法分类的依据：遗传特征