蛋白质样品的制备2.5

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1、加富培养基(enrichmentmedium)也称增殖培养基，即在基础培养基中加入有利于某种微生物生长繁殖所需的特殊营养物质，使这类微生物增殖速度比其它微生物快，从而使这类微生物在混有多种微生物的情况下占优势地位。这些特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液或提取物等。加富培养基加富培养基在胰蛋白胨琼脂或培养液加入各物质以供营养要求苛刻的细菌生长。如血琼脂（选择培养基）加入柠檬酸盐血的胰蛋白胨琼脂中发生不同的溶血作用而用于菌种鉴定，有三种溶血方式：1.α-溶血作用——菌落周围绿色至棕色的晕2.β-溶血作用——血细胞完全溶解，导致菌落周围的清晰的透明圈（金黄色

2、葡萄球菌）非溶血作用——培养基无变化巧克力培养基，可提供必需生长因子（流感嗜血杆菌）羊血平板培养基加富培养基鉴别培养基鉴别培养基(differentialmedium)是用于鉴别不同类型微生物的培养基。在培养基中加入某种特殊化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种微生物与其他微生物区分开来。主要用于细菌的快速分离鉴定急分离筛选某种特殊代谢产物的菌种。伊红美蓝乳糖培养基即EMB(EosinMethyleneBlue)培养基可区分乳糖发酵菌和半乳

3、糖发酵菌（含有乳糖、盐类和两种染料）大肠杆菌是乳糖发酵菌，会产生黑色菌落或金属光泽的菌落。而伤寒沙门氏菌是非乳糖发酵菌，菌落无色。细菌学检查：饮用水、牛奶的大肠菌群E.colide遗传学研究例1：培养基中加入适量的青霉素或链霉素，可抑制细菌和放线菌的生长，从而将真菌和酵母菌分离出来；例2：在马丁氏培养基中加入一定量的孟加拉红染料、链霉素能较好地选择培养真菌；例3：YEM(甘露醇酵母粉培养基)加刚果红或结晶紫可抑制G+细菌的生长。细菌在培养基中的生长情况液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长固体培养基：菌落，菌苔菌落在微生物学工作中，主要用于微生物的分离、纯化、鉴定、

4、计数等研究和选育种等的实际工作。菌落的形成菌落如果把单个细菌的细胞接种到适合的固体培养基上后，在适合的环境条件下细胞就能迅速生长繁殖，繁殖的结果是形成一个肉眼可见的细胞群体，我们把这个细菌的细胞群体称为菌落（colony）不同菌种其菌落特征不同，同一菌种因不同生活条件其菌落形态也不尽相同，但是同一菌种在相同培养条件下所形成的菌落形态是一致的，所以菌落形态特征对菌种的鉴定有一定的意义。菌落的特征菌落特征包括菌落的大小、形态（圆形、丝状、不规则状、假根状等），侧面观察菌落隆起程度（如扩展、台状、低凸状、乳头状等），菌落表面状态（如光滑、皱褶、颗粒状龟裂、同心圆状等），表面

5、光泽（如闪光、不闪光、金属光泽等），质地（如油脂状、膜状、粘、脆等），颜色与透明度（如透明、半透明、不透明等）细菌的菌落光滑型菌落（smoothcolony）S型菌落粗糙型菌落（roughcolony）R型菌落粘液型菌落（mucoidcolony）M型菌落如产荚膜的菌落表面光滑，粘稠状为光滑型（S-型）。不产荚膜的菌落表面干燥、皱褶为粗糙型（R-型）。铜绿假单孢菌的菌落特征粘质沙雷氏菌的菌落特征放线菌的菌落特征①菌落相对于其它细菌来说较小；②菌落质地致密，表面光平或有许多皱折；③在放大镜下观察，菌落外围具辐射状菌丝。大肠杆菌在EMB平板上的典型菌落菌苔菌苔：把大量分散

6、的纯种细胞密集的接种在固体培养基的较大表面上，结果出现大量“菌落”以相互联成一片，这就是菌苔。半固体培养基：无动力有动力