《液相色谱分离法》PPT课件

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1、§12-5液相色谱分离法色谱法是一种物理化学分离方法.特点：分离效率高，可将各种性质相似的组分彼此分离一、概述叶绿素的石油醚溶液石油醚CaCO3CaCO3固定相石油醚流动相洗脱洗脱tI色谱分离法色谱分离法是利用待分离组分在不相混容的两相中分配的差异而进行分离，其中一相为固定相，另一相为流动相，当流动相对固定相作相对移动时，待分离组分就在两相之间反复进行分配，由于不同物质的分配系数不同，造成其迁移速率的差别，从而得到分离。色谱法固定相固定方式固定相、流动相状态柱色谱法纸色谱法气相色谱法液相色谱法分配色谱法吸附色谱法离

2、子交换色谱法薄层色谱法分离机理分类凝胶色谱法二、液固吸附柱色谱法当试液加在色谱柱上方后，待分离组分就被吸附在柱的上端，再用流动相从柱的上方进行淋洗。如A、B两组分，假定固定相对A的吸附大于B，A先吸附在固定向上而后才是B，当进行洗脱时，经过解吸，吸附，由于A比B从固定相解吸进入流动相较困难，使A下行速度较慢，经过相同时间，在色谱柱上的位置就会出现A比B高。从而达到分离。对洗脱剂的要求:1.对组分的溶解度足够大2.不与试样组分和吸附剂发生化学反应3.粘度小,易流动4.有足够的纯度三、纸色谱以滤纸为载体被吸附于滤纸上的

3、水为固定相有机溶剂(展开剂)为流动相分离的实质是分配比不同的各组分在滤纸上迁移速度不同。（分配比大的组分较易进入有机相而较难进入水相，故随流动相上升的速度较快。）取一大小适宜的滤纸条在滤纸条的下端点上标准和试样放在色谱筒中展开取出，标记前沿，凉干着色，分析固定相：滤纸上的H2O流动相：展开剂溶剂前沿组分斑点ab原点用比移值Rf表示某组分在滤纸上的迁移情况Rf==——Rf取值范围0—1原点至斑点中心的距离原点至溶剂前沿的距离abΔRf>0.02时，可采用纸色谱进行分离。特点：测量需要量小，灵敏，分离效果好，但只适用于

4、分离分配比不同的物质。4.纸上层析法分离A和B时,A和B的比移值分别为Rf(A)=0.45,Rf(B)=0.67,为使分离后两斑点中心距离为3cm,层析用纸条长度至少应是。10.用纸上层析法分离A和B时，A和B的比移值分别为Rf(A)=0.45,Rf(B)=0.67。为使分离后两斑点中心之间的距离为2.2cm，层析用纸条长度最少应该是cm。14cm10