《液相色谱》PPT课件

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1、现代仪器分析MODERNINSTRUMENTALANALYSISAppleLu3高效液相色谱分析HighPerformanceLiquidChromatographyHPLC特点：经典液体柱色谱引入气相色谱法理论高压：突出特点；150×105～350×105Pa高速：20h----1h高效：GC-1000塔板/mHPLC—3万塔板/m(固定相)高灵敏度：UV；AFSHPLC与GC差别相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测主要差别：分析对象的差别和流动相的差别1．分析对象GC：能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品，高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品不可检测占有机物的20%H

2、PLC：溶解后能制成溶液的样品，不受样品挥发性和热稳定性的限制分子量大、难气化、热稳定性差及高分子和离子型样品均可检测用途广泛，占有机物的80%2．流动相差别GC：流动相为惰性气体组分与流动相无亲合作用力，只与固定相作用HPLC：流动相为液体流动相与组分间有亲合作用力，为提高柱的选择性、改善分离度增加了因素，对分离起很大作用流动相种类较多，选择余地广流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相可以增大分离选择性3．操作条件差别GC：加温操作HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小）影响色谱峰扩展及色谱分离的因素3-1H=A+B/u+C·u液体与气

3、体的不同？1.涡流扩散项HeHe=2λdp一定2.纵向扩散项HdHd=CdDm/试样分子本身运动所引起的纵向扩散，当线速度大于0.5时，可忽略3.传质阻力项：主要因素Hs=Csdf2/Ds试样分子从流动相进入到固定液Hm=Cmdp2/DmHsm=Csmdp2/Dm固定相传质阻力流动相传质阻力流动的流动相传质阻力滞留的流动相传质阻力（传质过程中主要作用）H=2λdp+CdDm/+Csdf2/Ds+Cmdp2/Dm+Csmdp2/DmABC主要因素：传质相C提高柱效有效途径：减小粒度Hmin小一个数量级柱外展宽：柱前峰展宽；柱后展宽试样注入到填料中心之内1～2mm处，减少柱前扩

4、散；连接管的体积和检测器的死体积应尽可能小。主要类型与分离原理basicprincipleandmainseparatingtypes3-2一、液-液分配色谱liquid-liquidpartitionchromatogra二、液-固吸附色谱liquid-solidadsorptionchromatograph三、离子交换色谱ion-exchangechromatograph四、空间排阻色谱size-exclusionchromatograph一、液-液分配色谱-化学键合相色谱固定相与流动相均为液体（互不相溶）；基本原理：组分在固定相和流动相上的相对溶解度不同；流动相：对于亲水性固定液，采

5、用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定液的极性（正相normalphase），反之，流动相的极性大于固定液的极性（反相reversephase）。正相与反相的出峰顺序相反；固定相：早期涂渍固定液，固定液流失？，较少采用；化学键合固定相：（将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶（担体）表面的游离羟基上。C-18柱（反相化学键合相色谱应用最广泛）。二、液-固吸附色谱liquid-solidadsorptionchromatography固定相：固体吸附剂如硅胶、氧化铝等，较常使用的是5～10μm的硅胶吸附剂；流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。基本原理：试样分子和流动相分子对固定相表面的竞争吸

6、附；适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性；缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾；三、离子交换色谱固定相：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂；流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液；基本原理：组分在固定相上发生的反复可逆离子交换反应；组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力大，保留时间长.阳离子交换：R—SO3H+M+=R—SO3M+H+阴离子交换：R—NR4OH+X-=R—NR4X+OH-离子交换树脂上可解离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换

7、，根据不同离子对交换剂具有不同亲和力实现分离。离子色谱法（IC）离子交换的基础上发展而来。水溶液中阴离子分析的最佳方法。固定相：离子交换树脂流动相：电解质溶液“用电导检测器对阳离子和阴离子混合物作常量和痕量分析的色谱法。分析时在分离柱后串接一根抑制柱，来抑制流动相中的电解质的背景电导率”空间排斥（阻）色谱SizeExclusionChromatographyM.W.tR四、排阻色谱色谱：不以相互作用力差异进行分离固定相：