力学应变对去势骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞分化能力的影响

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1、四川大学硕士学位论文主要缩略语中英文对照(按字母顺序排列)英文缩写英文全称中文名称脚Alkalinephosphatase碱性磷酸酶CbfalCorebmdingfactoralphal核心编码因子oCOLICollagenll型胶原DAB3,3’一diaminobenzidine3．，一二氨基联苯胺DEPCDiethtylpyrocarbonate焦炭酸二乙脂DMEMDulbecco'smodifiedeaglemediumDMEM培养基EINADeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸EBEthidiumbromide溴化乙锭EDTAEthylen

2、ediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸F-actinF-actinmicrofilamentF-肌动蛋白微丝R：MFIowcytometry流式细胞术FBSFetalboyineserum胎牛血清GAPDHGlyceraldehydephosphatedehydrogenase磷酸甘油醛脱氢酶HEPESHyoroxyethylpiperazineethanesulfonicacid羟乙基哌嗪乙磺酸LPLLipoproteinlipase脂蛋白脂酶MSCsMesenchymalstemcells骨髓间充质干细胞OCN0steocalcin骨钙素

3、OPN0steopotin骨桥蛋白OVXOvariectomy卵巢切除术ORXOrchcctomy睾丸切除术PBSPhosphalebufferedsaline磷酸盐缓冲液PcRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应n’Proliferationindex增殖指数PPARP目oxisomeproliferatoractivatedreceptor过氧化物酶增殖子激活受体唧Pa珀mv∞idhormone甲状旁腺激素RNARibonucleicacid核糖核酸RT-PCRReversetr删ptionPCR逆转录PcR四川大学硕士学位论文论文摘

4、要力学应变对去势骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞分化能力的影响生物医学工程专业研究生：井燕指导老师：李良力学负荷可促进骨组织生长发育，维持骨结构的完整性和功能。长期以来已经认识到力学负荷在骨质疏松的发生发展过程中具有重要的作用。大量流行病学证据提出，体育锻炼有利于提高峰值骨量和增加骨的强度和弹性，延迟骨质疏松的进展和预防骨质疏松性骨量丢失和骨折。骨质疏松是一种全身性的、代谢性的骨骼系统疾病。由于成骨细胞的功能活性降低和破骨细胞的功能活性增高，致使骨形成和骨吸收失平衡，导致净骨量丢失，易于骨折。成骨细胞来源于多潜能骨髓间充质干细胞(Mesenchymalstemcel

5、ls。MSCs)。成骨细胞功能活性的改变除了与成骨细胞数量、成骨细胞本身存活期有关外，其前体成骨细胞数量与功能活性也起到重要作用。MSCs具有干细胞的共性，即具有自我复制和多向分化能力，体外不同诱导条件下，能够向成骨细胞、成软骨细胞、肌腱细胞、脂肪细胞及基质细胞等不同的细胞系分化。近期有研究发现骨质疏松症引起的骨量减少往往与骨髓中的脂肪组织增多相伴行，但是有关细胞学机制还不十分清楚。我们近期的研究也发现，在大鼠骨质疏松模型中，MSCs的成骨分化能力降低，成脂分化能力明显增高。目前，有关骨细胞与力学作用的实验研究，多采用原代成骨细胞、成骨细胞株等进行。而有关力学应

6、变对成骨细胞前体细胞一MSCs作用的研究较少，尚未见有关力学应变对骨质疏松大鼠MSCs成骨分化能力影响的相关研究报道。因此，我们假设力学应变可以促进MSCs的成骨分化能力，抑制其成脂分化能力。本研究的目的就是观察力学应变对去势骨质疏松(去卵巢和去睾丸)大鼠与正常大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响，为骨质疏松症发生的细胞学机制提供新的佐证。2四川I大学硕士学位论文选用健康6月龄Sprague．Dawley(SD)大鼠，采用双侧卵巢或者双侧睾丸切除术，建立骨质疏松动物模型。动物实验分成4组：雌性对照组(Contr01．1)、卵巢切除组(OⅥ()、雄性对照组(Cont

7、r01．2)、睾丸切除组(ogx)。手术后3个月，检测动物体重、子宫及睾丸重量；做骨组织形态学切片，观察骨组织形态和骨细胞功能活性的变化，以确定模型建立成功。采用密度梯度离心法获取大鼠骨髓间充质干细胞(Mcscnchymalstemcells，MSCs)，用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44／CD45分子的表达。采用本室自制的双轴力学应变加载系统对细胞旌加大小为4000／zstrain，频率为l赫兹的力学应变。每天加载3次，每次2小时，间隔2小时。力学实验分为：(1)加力1天组：用该系统加力1天；(2)静态培养I天组：不加力学应变，与(1)培养相同时间；(3)加

8、力3天组：用该系统加力3