骨髓间充质干细胞移植治疗去势大鼠骨质疏松的研究

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2、……………………1英文摘要………………………………………………………………………………3前言……………………………………………………………………………………5第一部分大鼠骨髓间充质干细胞的培养与诱导成骨分化及鉴定………………..8材料与方法…………………………………………………………………………9结果………………………………………………………………………………..12讨论………………………………………………………………………………..14结论…………………………………………………………………………

3、……..18第二部分骨髓间充质干细胞治疗去势大鼠骨质疏松的研究……………………19材料与方法………………………………………………………………………..20结果………………………………………………………………………………..24讨论………………………………………………………………………………..29结论………………………………………………………………………………..34参考文献……………………………………………………………………………..36文献综述…………………………………………………………………

4、…………..39攻读学位期间主要研究成果………………………………………………………..52致谢…………………………………………………………………………………..53学位论文原创性声明………………………………………………………………..54学位论文知识产权权属声明………………………………………………………..54关于学位论文使用授权的说明……………………………………………………..543广州医学院硕士学位论文骨髓间充质干细胞移植治疗去势大鼠骨质疏松的研究缩略语简表BMSCsBonemarrowmes

5、enchymalstemcells骨髓间充质干细胞BMDBonemineraldensity骨密度OPOsteoporosis骨质疏松症POPPrimaryosteoporosis原发性骨质疏松SOPSecondaryosteoporosis继发性骨质疏松MMAMethylmethacrylate甲基丙烯酸甲酯DBPDibutylphthalate邻苯二甲酸二丁酯BPOBenzoylperoxide无水过氧化苯甲酰4广州医学院硕士学位论文骨髓间充质干细胞移植治疗去势大鼠骨质疏松的研究骨髓间充质干细

6、胞移植治疗去势大鼠骨质疏松的研究硕士研究生：余博臣导师：高梁斌教授专业：脊柱外科中文摘要第一部分大鼠骨髓间充质干细胞的培养与诱导成骨分化及鉴定摘要背景：骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能，但在骨髓中含量极低，收集足够数量的骨髓间充质干细胞，对组织工程及细胞的体内、外实验至关重要。目的：通过体外获取和培养纯度高、生物特性均一的骨髓间充质干细胞，并向成骨诱导分化，为后续实验做准备。方法：通过全骨髓贴壁法分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞，进行形态学观察，流式细胞仪检测细胞表面标记物，鉴定后将所有骨髓间

7、充质干细胞向成骨诱导分化。结果：大鼠骨髓间充质干细胞生长以梭形细胞为主，呈放射状排列的细胞集落，可连续稳定传代6代以上。第3代骨髓间充质干细胞CD44呈阳性表达，而CD45呈阴性。成骨诱导后，经茜素红染色8结果为阳性。所得细胞总数为2.0×10个，纯度达99.27%。结论：全骨髓贴壁培养法操作简单，可大量分离、纯化、扩增骨髓间充质干细胞，所获细胞具有间充质干细胞的一般生物学特性，经诱导培养后向成骨诱导分化，可为后续实验提供基础。关键词：骨髓间充质干细胞；培养；形态学；成骨分化5广州医学院硕士学位论

8、文骨髓间充质干细胞移植治疗去势大鼠骨质疏松的研究第二部分骨髓间充质干细胞治疗去势大鼠骨质疏松的研究摘要目的：探讨去势骨质疏松大鼠股骨骨髓腔注入骨髓间充质干细胞对股骨骨密度、生物力学及骨微结构的影响。方法：将32只六月龄雌性SD大鼠随机分为：假切（Sham）对照组12只和骨质疏松组20只，双侧卵巢切除术后3个月两组各随机取4只大鼠处死后测股骨骨密度，再将骨质疏松组随机分成单纯去势（OVX）组及去势+骨髓间充质干细胞组（OVX+MSC）组各8只，OVX+MSC组大鼠双侧股骨骨髓腔注入诱