蛋鸡体内AMPK酶活分布及应激对AMPK酶活影响研究

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1、四川农业大学硕士学位论文蛋鸡体内AMPK酶活分布及应激对AMPK酶活影响研究姓名：秦玉辉申请学位级别：硕士专业：动物营养与饲料科学指导教师：陈代文20030601摘要本试验旨在研究蛋鸡体内CAMP激活的蛋白激酶(AMPK)的酶活分布，以及应激对蛋鸡生产性能、血液生化指标、AMPK及乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性的影响。试验采用单因子试验设计，分为对照(c)、饥饿∞和热应激(}I)三个处理组。18只健康的产蛋鸡按体重一致的原则分成3组，再随机分配到3个处理组。所有蛋鸡先在常温(18±2℃)下预饲一周，然后再进行正式试验。C组在18±2℃环境饲养，自由采食，F组饥饿48小时

2、，环境温度与对照组一样，H组在38±2℃高温(湿度40％一50％)环境生活72小时，自由采食。试验结束时，每组选取5只鸡屠宰，取骨骼肌、肝脏、十二指肠和心脏以测定其中的AblPK和ACC活性。屠宰时抽血以测定血清碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(Tc)和血糖(GLu)含量。试验结果表明，饥饿引起蛋鸡产蛋率下降33．33％。同时引起血清ALP活性升高156．19％(p

3、量下降50．71％(p

4、应激引起蛋鸡肝脏AMPK活性升高16．27％，ACC活性下降22．46％(p<0．05)；骨骼肌AMPK活性升高20．61％，对ACC没有影响；心肌A～IPK酶活升高7．32％，ACC活性下降26．16％；十二指肠AMPK活性升高11．36％，ACE活性下降4．19％。由以上结果得到以下结论：(1)蛋鸡肝脏、骨骼肌、心肌和十二指肠都有AMPK分布．因组织器官不同AblPK酶活存在一定差异。(2)饥饿或热应激引起蛋鸡某些组织器^官AMPK激括，ACC活性下降以及血清甘油三酯、胆固醇含量下降。结果表明AMPK与蛋鸡应激代谢有关。关键词：蛋鸡热应激饥饿AMP激活的蛋白激酶乙酰

5、辅酶A羧化酶本研究为教育部重点项目“AI'ⅧPK在畜禽组织中的分布规律”的研究内容(02zQ026-osa)前言在现代集约化畜牧生产中，动物时常遭受各种应激，导致畜禽采食量降低、胃肠消化力和机体免疫力下降、生长减慢等，严重影响动物生产性能、生产成绩和产品质量．给养殖户带来巨大的经济损失(周琼，1998；刘艳琴，1998；李俊杰，2000；陈汉生，2001等)。如何缓解应激的危害以及对应激机理的研究是迫切需要解决的问题。目前关于畜禽应激机理主要从神经内分泌(张振斌，1999；陈代陆，2001等)、免疫功能(张振斌，1999；高玉鹏，2001a，b；赵君梅，2002等)以及

6、机体各种生理生化改变(李建国，1998；薛占永，1999；刘铀，1999：张振斌，2000等)进行了研究。从营养角度看，应激必然影响营养代谢，一切应激症状均是营养代谢过程或代谢效率改变的结果(陈代文，2002)。但应激如何影响营养代谢，如何通过营养管理来克服或缓解应激的不良影响．目前知之甚少。畜禽应激时，无疑也会引起机体最基本的单元——细胞的应激，细胞应激如何影响细胞内营养物质代谢有待进一步研究。在实验动物(大鼠)中研究表明，AMP激活的蛋白激酶(AMPK)在动物(细胞)应激(生理、营养、环境和疾病等)中起着重要作用(Woods，1996；Hardie．1998；Har

7、die，1997；Carlson，1999；Winder’1999；Kemp，1999：Park，2002)。AMPK不象其它激酶要参与从其它细胞来的信息加工过程，它只对细胞内的环境变化作出反应，其功能只在单个细胞体现(Hardie，1997)。AMPK系统起着如“燃料开关”的作用来保护单个细胞，或者更精确地说是作为“低燃料警示系统”对细胞ATP耗尽作出反应(Hardie，1997；Winder,1999)。AMPK活化对细胞内营养代谢调节的总的方向是抑制ATP消耗过程，促进ATP的生成反应。即AMPK通过关闭消耗ATP的生物合成途径，开