多基因转化741杨及其基因表达的初步研究

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1、摘要本文是在田颖川和郑钧宝等研究的转双抗虫基因741杨基础上，成功的转化了Ri，质粒15834菌株，并以转双抗虫基因74l杨和741杨单转Ri质粒15834菌株为对照，研究多基因的转化以及初步探讨了多基因之间的基因表达。通过7DfD基因和删s基因，坳fⅣ基因和Bfcw』爿c基因的PcR检测和外部形态差异对转多基因植株进行鉴定，表明多基因共存于转基因植株中。1．对转多基因741杨各株系试管苗的生根率、根长、根量、高生长量及叶片及茎形态变异进行研究，得出大多数转多基因741杨表现出Ri质粒转化植物的典型特征，转化植株的叶片均在Mso培养基上具有自发根的特性，形态表现为叶片皱缩、茎生长量减少，

2、试管苗生根率高，侧根极为发达等特点。98％左右转基因株系的生根率比对照植株都有明显提高：转多基因株系的根数量比对照都有增加，根发达，形成簇生根，多得几乎无法计数；根长度大多数株系明显高于对照，有少数的株系与对照植株相似，有部分株系的根长明显短于对照；多基因转化74l毛白杨后，引起转化植株叶片增厚，叶面积明显缩小，叶柄变短，叶面皱缩；茎节间缩短，茁高生长减少，分枝数量增加，个别株系出现茎弯曲生长，严重影响了苗木的正常生长，但是有少量株系的植株出现了正常生长的情况，甚至对生长有一定促进作用。2．通过HPLC法对转多基因741杨不同株系的植株叶片的内源激素进行了测定。几乎所有转多基因74l杨株

3、系中，植株叶片中内源IAA含量均高于转双抗虫基因741杨，植株生长表现越矮小的叶片中IAA含量越高，大部分株系比741杨单转Ri质粒15834菌株对照含量低。3．采用ELIsA技术，对转多基因741杨不同株系转基因苗和毛状根中历毒蛋白进行测定，结果表明研毒蛋白在叶片和毛状根中均有表达，叶片毒蛋白表达量明显高于毛状根的。转多基因苗中不论是其叶片还是毛状根，其毒蛋白含量大部分株系均比转双抗虫基因741杨的毒蛋白含量低，比单转Ri质粒15834菌株的含量高。表明转入发根农杆菌后，其原来根癌农杆菌毒蛋白表达含量降低了。发根农杆菌的转入对根癌农杆菌中的毒蛋白含量有一定的影响，其增加和降低将会对组培

4、苗体内的各个指标有一定的影响，尤其会影响植物的生长发育。而植物激素含量恰恰是这一影响的一个具体表现，反过来又会影响植物的生长发育，进而再影响到的毒蛋白残留与降解的变化。关键词：Ri质粒；741杨；多基因转化；形态变异；植物内源激素；Br毒蛋白PreliminaryStudyonPolygenes’I'ansf0I。matiOnPopIar74landGenicExpressionAu世Ior：zhangshuj嗽Major：Fore8t仃eegeneticsandbr∞dingSupervis甜：P∞￡№IngMinsbe鸥A蜘lr8ctIntllissmdy，on龇base“Trmls

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