脐血细胞体外扩增与骨髓间充质干细胞

脐血细胞体外扩增与骨髓间充质干细胞

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1、脐血细胞体外扩增一亘R丝M型竺竺一一一一一一一.—中文摘要脐A中含有造血干/祖细胞(hematopoieticstem/progenitorcell,HS/PC),且由于其来源广泛,获取容易,移植后移植物抗宿主病轻,成为骨髓和外周血干/祖细胞移植的较为理想的替代来源。但是,单份脐血内含有的HS/PC数量不足以满足对大多数成人移植的需要,制约着脐血移植的广泛开展。解决上述问题的方法是实现HS/PC的体外扩增(expansionexvivo),这己成为目前研究的热点。本研究的目的是观察细胞因子及骨髓间充质干细胞(mese

2、nchymalstemcell,MSC)在体外HS/PC维持和扩增方面的作用,寻找有效的体外HS/PC扩增方案。实验共分为6组:①对照组,仅含有培养基;OOSTF组,细胞因子SCF+TPO+FLT3-L;.STFS组,细胞因子SCF+TPO+FLT3-L+SDF-1a;.MSC组,MSC滋养层:OMSC十STF组,MSC滋养层+细胞因子组合STF;)MSC+STFS组,MSC滋养层+细胞因子组合STFS。共培养7天,观察培养前后各个指标的变化。研究结果显示:(1)对照组维持原有细胞总数的29.5%士14.1%,MSC

3、组1.6士0.9倍,P=0.031;STF组与STFS组,13.4士5.8倍vs12.215.9倍,P=0.562;MSC+STF组与MSC+STFS组,50.2117.8倍vs46.5114.5倍,P=0.112;STF组与MSC+STF组,P=0.004;STFS组与MSC+STFS组,P=0.005.(2)对照组维持扩增前CD34+细胞的18.7%士2.7%,MSC组71.2%士51.2%,P=0.137;STF组与STFS组,2.7士1.2倍vs2.9士1.7倍,P=0.716;MSC+STF组与MSC+ST

4、FS组,6.7士2.9倍vs6.5士2.6倍,P=0.299;STF组与MSC+STF组,P=0.041;STFS组与MSC+STFS组,P=0.006.(3)对照组维持扩增前CD34+CD90+细胞的15.9%士23.0%,MSC脐血细胞体外扩增与骨越间充质千细胞组1.4士0.7倍,P=0.054;STF组与STFS组,2.9士3.1倍vs3.6士4.9倍,P=0.519;MSC+STF组与MSC+STFS组,27.4士14.0倍vs22.5士5.6倍,P=0.505;STF组与MSC+STF组,P=0.037;S

5、TFS组与MSC+STFS组,P=0.0310(4)对照组维持扩增前CD34+CD61+细胞的8.2%士2.0%,MSC组91.1%士115.2%,P=0.239;STF组与STFS组,2.1士2.9倍vs2.6士3.8倍,P=0.427;MSC+STF组与MSC+STFS组,9.5士8.9倍vs10.4士7.2倍,P=0.546;STF组与MSC+STF组,P=0.096,STFS组与MSC+STFS组,P=0.044.(5)红系爆式集落BFU-E,对照组维持扩增前集落的11.4%士11.3%,MSc组65.1%士

6、45.6%,P=0.153;STF组与STFS组,5.7士2.5倍vs5.2士2.7倍,P=0.498;MSC+STF组与MSC+STFS组,18.2士16.7倍vs15.1士12.7倍,P=0.295;STF组与MSC+STF组,P=0.136,STFS组与MSC+STFS组,P=0.1310(6)粒巨噬系集落CFU-GM,对照组维持扩增前集落的11.6%士7.9%,MSC组92.9%士74.90/x,P=0.136;STF组与STFS组,5.0士2.3倍vs3.8士2.4倍,P=0.138;MSC+STF组与MS

7、C+STFS组,19.5士14.9倍vs20.2士14.8倍,P=0.453;STF组与MSC+STF组,P=0.067;STFS组与MSC+STFS组,P=0.0440(7)混合集落CFU-GEMM,对照组维持扩增前集落的9.4%士7.7%,MSC组76.4%士27.5%,P=0.035;STF组与STFS组,5.6士1.9倍vs5.7士2.9倍,P=0.967;MSC+STF组与MSC+STFS组,33.7士24.1倍vs24.4士18.3倍,P=0.276;STF组与MSC+STF组,P=0.049;STFS组

8、与MSC+STFS组,P=0.0710(8)扩增后的细胞依旧表达CD440小结:(1)间充质干细胞与细胞因子混合培养体系优于单纯的细胞因子培养体系。尤其在扩增早期造血干祖细胞(CD34+CD90+细胞)方面。单纯细胞因子组合扩增2.9士3.1倍,含有MSc层和细胞因子的混合培养体系扩增27.4士14.0倍。(2)在我们的实验登drtIES体外扩

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