胎盘间充质干细胞对骨髓、脐血、胎盘不同来源造血干细胞的体外扩增支持作用比较硕士论文

《胎盘间充质干细胞对骨髓、脐血、胎盘不同来源造血干细胞的体外扩增支持作用比较硕士论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、原创性声明18S720,g本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：祁女仅日期：译了月7，日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位

2、论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大争学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：与B勺双日期：勿甲年，月岁／日J1J●1艄2009届硕士学位论文胎盘间充质干细胞对骨髓，脐血，胎盘不同来源造血千细胞的体外"着支持㈣幽删删㈣Y18HI)ti3llIttl3lIHll7JIIll‘§。9Illil。胎盘问充质干细胞对骨髓、脐血、胎盘不同来源造血干细胞的体外扩增支持作用比较研究生：邹旭风导师：刘玉峰教

3、授郑州大学第一附属医院小儿内科郑州450052中文摘要研究背景及目的间充质干细胞(mesenehymalstemcell，MSC)是目前倍受关注的一类具有多向分化潜能的组织干细胞。Fridenestein等于1976年最早利用骨髓贴壁层细胞培养形成了成纤维细胞和其它间质细胞。随后其他学者也描述了来源于骨髓的非造血性贴壁细胞，可以分化为成熟的间质细胞。认为这种原始细胞可形成骨髓和外膜间质细胞，构成造血的微环境，形成结缔组织骨架并产生细胞因子、化学因子和细胞外基质蛋白来调节造血细胞的归巢和增殖。体外培养MSC分泌多种造血因子，并能表达多种表面粘附分子，在造血

4、调控中具有一定的作用。因此，移植MSC使其恢复骨髓微环境，支持自体和同种异基因造血干细胞移植和重建，引起了很多研究者的关注。造血干／祖细胞(hematopoietieStem／progenitorCell，HSPC)的扩增和增殖，造血因子是必不可少的。Hyanesworht等培养了可向成骨细胞和成软骨细胞分化的原始间充质细胞，单克隆抗体检测其表达SH．2、SH．3和SH．4。在无造血细胞和分化刺激存在的培养条件下，可产生多种造血相关因子，包括干细胞因子(cse3、白血病抑制因子(UF)、巨嗜系集落刺激因子(M．CSF)、粒系集落刺激因子(G．CFS)、白

5、细胞介素IL=6和ILll。而粒单系集落刺激因子(MG．CSF)、IL-3、转化生长因子(TOF．B2)未被检测到。用具有能增强骨髓基质细胞支持造血能力的因子IL-Ia，刺激这种原始间充质细胞，可提高其G．CFs、M-CFS、LIF、IL-6和U．11的产生水平，而且工IL-Ia还能诱导其产生GM．CSF。Majumdar等比较了骨髓来源的MCS和传统基质细胞，通过RT-PRC检测了造血相关因子mRNA的郑州大学2009届预．哇掣猫磁汶胎盘问充贡干细胞对骨髓，脐血，胎盘不同来源造睡干细胞的体外扩增支持作用比较表达，结果表明MSC稳定的表达多种造血相关因子

6、ID6、IL-7、IL,-8、Ⅱ，11、．12、IL，14、IL-15、M．CSF、SCF和FIt．3配体(FL)，且Ibll、IL-12的表达水平明显高于基质细胞。两种细胞在IL-la诱导下均表达G．CFs和GM．CFS，但LIF和IL-Ia的mRNA则只在MSC中被诱导表达。目前对造血干细胞CD34+的体外扩增主要靠加入不同组合的细胞因子，体外加入的细胞因子很难模拟造血的微环境，且在培养过程中需要不断加入，价格昂贵，不适合长期培养。近来有研究者用骨髓基质支持骨髓来源的CD34+细胞，用胎盘来源的间充质干细胞支持脐血来源的CD34+细胞，也取得很好的效

7、果，胎盘作为胎儿的附属物，在胎儿娩出后往往作为废弃物被处理，近年有研究者发现胎盘组织及胎盘血中存在造血干细胞，及间充质干细胞，并且研究证实胎盘间充质干细胞可分泌多种造血相关因子。因此我们从胎盘中分离出间充质干细胞，作为不同来源的CD34+的滋养层，观察其对不同来源造血干细胞的支持扩增作用的差别。材料：胎盘及脐血样品：正常健康新鲜的胎盘组织和脐血来自郑大一附院妇产科。骨髓样品正常新鲜的骨髓来自郑大一附院儿科磁性细胞分选仪及CD34+细胞分离盒为MiltcnyiBiotec公司产品。细胞因子和抗体：B．fbf为Gibco公司产品。抗CD29、CDl9、CD3

8、4、CD44、CD45、HLA-DR、HLA-ABC、CDl05、CDl06及U