病毒性肝炎患者血清NO浓度与TNFα、IL1β水平的关系

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1、病毒性肝炎患者血清NO浓度与TNF-α、IL-1β水平的关系【摘要】目的探讨病毒性肝炎患者血清中一氧化氮(NO)浓度、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量水平及它们在病毒性肝炎病理机制中的作用。方法用硝酸还原酶法测定NO浓度,采用双抗体夹心ELISA法测定TNF-α浓度和IL-1β浓度,包括丙肝患者、乙肝大三阳(HBsAg阳性、HBeAg阳性、HBcAb阳性)患者、乙肝小三阳(HBsAg阳性、HBeAb阳性、HBcAb阳性)患者和健康对照组。结果血清中NO、TNF-α、IL-1β的水平,丙

2、肝患者、大三阳、小三阳患者与健康对照组比较差异有统计学意义;NO、TNF-α含量,大、小三阳患者差异有统计学意义;IL-1β两者差异无统计学意义。结论NO、TNF-α、IL-1β可能参与了病毒性肝炎的炎性损伤过程。【关键词】病毒性肝炎患者;一氧化氮;肿瘤坏死因子;白细胞介素[Abstract]ObjectiveTostudythelevelofNO,TNF-αandIL-1βinserumofpatientswithvirtushepatitisanditsclinicalsignificance.MethodsNO

3、,TNF-αandIL-1βweredeterminedbybiochemicalandimmunologicalmethod.Patientsweredividedinto4groupsaccordingtohepatitismarkersdeterminedbyELISA:HCV(+)(groupA);HBsAg(+),HBeAg(+),HBsAg(+)(groupB);HBsAg(+),HBeAb(+),HBcAb(+)(groupC);individualswithnegative8(controlgroup

4、).ResultsThelevelofserumNO,TNF-αandIL-1βofpatientsingroupA,BandCweresignificantlyhigherthanthatincontrolgroup.ThedifferenceofthelevelsofNO,TNF-αandIL-1βwasnotsignificantbetweengroupBandgroupC.ConclusionNO,TNF-αandIL-1βmayparticipateinliverdamageofvirtushepatis.

5、[Keywords]virtushepatitis;nitrosoxide;tumornecrosisfactor;interleukin病毒性肝炎是一种感染人数众多,危害极大的传染性疾病,病毒对肝脏的损伤机制错综复杂,本文检测病毒性肝炎患者血清中TNF-α、IL-1β和NO的水平,通过对这些数据的分析来探讨它们在病毒性肝炎病理机制中的作用。1资料与方法1.1一般资料我院2005年1~11月收治129例病毒性肝炎患者(包括长宁区中心医院同期25例丙肝患者),男63例,女66例,年龄18~85岁,平均51岁,其中丙肝患

6、者43例,乙肝大三阳患者42例,乙肝小三阳患者44例;静脉采血38ml,分离血清冰冻备用。设健康对照组43例,男22例,女21例,平均年龄45岁,为我院体检三对半、丙肝指标皆为阴性的健康人群,静脉采血3ml,分离血清备用。1.2方法和步骤以晶美微生物工程(北京)有限公司提供的一氧化氮(NO)试剂盒(酶法)检测患者血清中的NO的含量。操作步骤如下:(1)准确吸取待测血清0.1ml及标准品(KNO3标准100.0μml/L)、双蒸水(作为空白管),再加入磷酸盐缓冲液、硝酸还原酶各0.1ml,轻轻混匀,37℃水浴1h。(2

7、)再加入显色剂混匀,室温放置10min。(3)比色,530mm波长,以双蒸水空白调零,读取各管吸光度值。人血清NO浓度为50~110μml/L。人TNF-αELISA试剂盒,人IL-1βELISA试剂盒检测患者血清中的肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)。操作步骤如下:(1)除空白孔外,分别将标本或不同浓度标准品(100μml/孔)加入相应孔中,用封板胶封住反应孔,37℃孵箱孵育90min,洗板。(2)除空白孔外,加入生物素抗体工作液(100μl/孔)封住板孔,37℃孵箱孵育60min,洗板。(

8、3)加入酶结合物工作液(100μl/孔)封住板孔,37℃孵箱孵育30min,洗板。(4)加入显色剂(100μl/孔),37℃避光显色15~20min。(5)加入终止液(100μl/孔),混匀即刻测量OD450值。(6)然后在手工绘制的标准曲线上测出标本的浓度。1.3统计学方法检测结果均以均数±标准差(x±s)表示;计量资料组间比较采用t检验,P

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