病毒性肝炎患者血清no浓度与tnf

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1、病毒性肝炎患者血清NO浓度与TNF【摘要】目的探讨病毒性肝炎患者血清中一氧化氮（NO）浓度、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的含量水平及它们在病毒性肝炎病理机制中的作用。方法用硝酸还原酶法测定NO浓度，采用双抗体夹心ELISA法测定TNF-α浓度和IL-1β浓度，包括丙肝患者、乙肝大三阳（HBsAg阳性、HBeAg阳性、HBcAb阳性）患者、乙肝小三阳（HBsAg阳性、HBeAb阳性、HBcAb阳性）患者和健康对照组。结果血清中NO、TNF-α、IL-1β的水平，丙肝患者、大三阳、小三阳患者与健康对照组比较差异有

2、统计学意义；NO、TNF-α含量，大、小三阳患者差异有统计学意义；IL-1β两者差异无统计学意义。结论NO、TNF-α、IL-1β可能参与了病毒性肝炎的炎性损伤过程。【关键词】病毒性肝炎患者；一氧化氮；肿瘤坏死因子；白细胞介素［Abstract］ObjectiveTostudythelevelofNO，TNF-αandIL-1βinserumofpatientsinedbybiochemicalandimmunologicalmethod.PatientsarkersdeterminedbyELISA:HCV（+）（groupA）；HBs

3、Ag（+），HBeAg（+），HBsAg（+）（groupB）；HBsAg（+），HBeAb（+），HBcAb（+）（groupC）；individualsNO，TNF-αandIL-1βofpatientsingroupA，BandCayparticipateinliverdamageofvirtushepatis.［Keyornecrosisfactor；interleukin病毒性肝炎是一种感染人数众多，危害极大的传染性疾病，病毒对肝脏的损伤机制错综复杂，本文检测病毒性肝炎患者血清中TNF-α、IL-1β和NO的水平，通过对这些数据

4、的分析来探讨它们在病毒性肝炎病理机制中的作用。1资料与方法1.1一般资料我院2005年1～11月收治129例病毒性肝炎患者（包括长宁区中心医院同期25例丙肝患者），男63例，女66例，年龄18～85岁，平均51岁，其中丙肝患者43例，乙肝大三阳患者42例，乙肝小三阳患者44例；静脉采血3ml，分离血清冰冻备用。设健康对照组43例，男22例，女21例，平均年龄45岁，为我院体检三对半、丙肝指标皆为阴性的健康人群，静脉采血3ml，分离血清备用。1.2方法和步骤以晶美微生物工程（北京）有限公司提供的一氧化氮（NO）试剂盒（酶法）检测患者血清中的

5、NO的含量。操作步骤如下：（1）准确吸取待测血清0.1ml及标准品（KNO3标准100.0μml/L）、双蒸水（作为空白管），再加入磷酸盐缓冲液、硝酸还原酶各0.1ml，轻轻混匀，37℃水浴1h。（2）再加入显色剂混匀，室温放置10min。（3）比色，530mm波长，以双蒸水空白调零，读取各管吸光度值。人血清NO浓度为50～110μml/L。人TNF-αELISA试剂盒，人IL-1βELISA试剂盒检测患者血清中的肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）。操作步骤如下：（1）除空白孔外，分别将标本或不同浓度标准品（100

6、μml/孔）加入相应孔中，用封板胶封住反应孔，37℃孵箱孵育90min，洗板。（2）除空白孔外，加入生物素抗体工作液（100μl/孔）封住板孔，37℃孵箱孵育60min，洗板。（3）加入酶结合物工作液（100μl/孔）封住板孔，37℃孵箱孵育30min，洗板。（4）加入显色剂（100μl/孔），37℃避光显色15～20min。（5）加入终止液（100μl/孔），混匀即刻测量OD450值。（6）然后在手工绘制的标准曲线上测出标本的浓度。1.3统计学方法检测结果均以均数±标准差（x±s）表示；计量资料组间比较采用t检验，P<0.05为差

7、异有统计学意义。2结果2.1对照组、丙肝组、乙肝大三阳组、乙肝小三阳组结果比较NO含量：丙肝组、大三阳组、小三阳组与对照组比较差异有显著统计学意义（P<0.01）。TNF-α含量：丙肝组、大三阳组与对照组比较差异有非常统计学意义（P<0.01），小三阳组与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。IL-1β含量：丙肝组与健康对照组比较差异有显著统计学意义（P<0.01），大三阳组、小三阳组与健康对照组比较差异有统计学意义（P<0.05），见表1。2.2乙肝大三阳组与乙肝小三阳组结果比较NO、TNF-α含量，大三

8、阳组与小三阳组比较差异有显著统计学意义（P<0.01）；IL-1β含量，大、小三阳组比较差异无统计学意义（P>0.05）。表1各种病毒性肝炎的NO、TNF-α、IL-1β的水平比较