紫苏高产迷迭香酸悬浮细胞的培养条件优化

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1、分类号：Q813．1密级：(秘密、机密、绝密)学校代码：10057研究生学号}08840004紫苏高产迷迭香酸悬浮细胞的培养条件优化StudyonOptimizationofCultureConditionofPerillaFrutescensSuspensionCell专业名称：粮食、油脂及植物蛋白工程指导教师姓名：吕晓玲教授研究生姓名：孙晶磊申请学位级别：工学硕士论文提交FI期：2010年12月论文课题来源：合作项目学位授予单位：天津科技大学天津科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本

2、人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。除文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果内容，也不包括为获得天津科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：铆t函舰同期：加ff年3月彳同知识产权和专利权保护声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师具体指导下并得到相关研究经费支持下完成的，其数据和研究成果归属于导师和作者本人，知识产权单位属天津科技

3、大学；所涉及的创造性发明的专利权及使用权完全归天津科技大学所有。本人保证毕业后，以本论文数据和资料发表论文或使用论文工作成果时署名第一单位仍然为天津科技大学。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：翟均氟日期：为l／年弓月1同学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，同意公布论文的全部或部分内容，允许论文被查阅和借阅。本人授权天津科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采

4、用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密ll(请在方框内打“、／”)，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密l叫(请在方框内打“1J”)。作者签名：研威麂同期：例f年弓月节同导师签名：昌蜕玲H期：加11年；月『o171摘要本实验以紫苏外植体作为研究材料，以建立并且优化高产迷迭香酸的紫苏细胞悬浮体系为目的，分别从紫苏外植体的消毒，愈伤组织的诱导，细胞悬浮体系的建立以及悬浮培养条件的优化等方面进行了研究。其研究结果如下：(1)分别以紫苏叶片、茎段、子叶为外植体，采用0．1％升汞溶液和2％次

5、氯酸钠溶液以不同处理时间对外植体进行消毒，探讨不同处理条件对外植体污染率和诱导率的影响。结果表明，综合考虑紫苏叶片，茎段，子叶的污染率与诱导率，选取紫苏的叶片进行愈伤组织的诱导，先用75％乙醇处理30S，再用O．1％升汞溶液处理7min，此时污染率为5％，诱导率为80．7％。(2)分别向B5、MS两种基本培养基中添加不同浓度的激素组合，通过正交实验，研究不同培养基以及激素浓度对紫苏叶片愈伤组织诱导率的影响。综合考虑愈伤组织的诱导率以及愈伤组织的生长状况，可以得出，紫苏的叶片诱导愈伤组织的最优培养基为B5培

6、养基，添加激素为2，4一D1．0mg／L，KT0．4mg／L，6-BAl．0mg／L，NAAl．5mg／L。(3)以悬浮细胞中迷迭香酸含量为最终考察目标，通过单因素实验以及正交实验表明，紫苏悬浮细胞较好培养体系为B5液体培养基，pH6．0，蔗糖浓度4．0％，肌醇浓度150mg／L，6-BA2．0mg／L，2,4一D2．0mg／L，KT0．4mg／L，NAAl．5mg／L。(4)通过高效液相色谱测定紫苏外植体，愈伤组织以及悬浮细胞中迷迭香酸的含量，可以得出叶片中含量为0．25％，茎中含量为0．72％，愈伤组

7、织中含量为3．85％，悬浮细胞中含量(干重)为15．8mg／g～26．1mg／g。与外植体中的含量相比，有了显著的提高。关键词：紫苏；迷迭香酸；愈伤组织；悬浮细胞ABSTRACTTakethePeritlafrutescensplantasmaterialtobuiltandoptimizethesuspensionsystemofPerillafrutescenscell．Thesterilizationofplant，theinductionofleaves，theestablishmentofsus

8、pensionsystemandoptimizethecontidionsofsuspensioncellwereresearchedinthispaper．Therestultsasfollows：First，thestems，leaves，andcotyledonofPerillafrutescensweretreatedasexplantswith0．1％HgCl，and2％NaCiOaccordingtodiffere