欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:36716198
大小:3.03 MB
页数:45页
时间:2019-05-14
《大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛后缝隙连接形态学检测》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得直昌大堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写):弩陟签字日期:∥埤西嘶学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学
2、可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表,并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名(手写):脊碜岔导师签名(手写):劣A‘、签字日期:2.Ol=》年口‘月开日签字日期:歹pl弓年16l厶月矽J日摘要目的:成功建立大鼠SAH后CVS模型,利用印度墨汁染色脑血管浇铸实验法测定和
3、对比脑基底动脉直径的改变。应用激光扫描共聚焦显微镜、电镜等技术观察大鼠蛛网膜下腔出血脑血管痉挛前后脑基底动脉各层中Cx43和Cx40表达的改变及其缝隙连接超微结构特征,进一步探讨大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛发生机制及其缝隙连接在其中可能发挥的作用。方法:1、选以成年SD大鼠(南昌大学医学院动物科学部提供)作为模型动物,采用经枕大池二次注血建立蛛网膜下腔出血脑血管痉挛模型实验方法。2、CVS模型检测:采用脑血管浇铸法分别测定正常组和SAH3d、7d、14d组大鼠基底动脉直径来证实脑血管痉挛(CVS)的存在。3、本实验应用激光扫描共聚焦显微镜观
4、测缝隙连接蛋I兰tCx43和Cx40在脑基底动脉管壁各层分布情况,应用程序图象对将其所得数字化图像进行计算机中进行处理分析。对缝隙连接蛋1刍Cx40和Cx43像素密度和其荧光斑面积的大小的进行准确测定,并将应用所获得的图像素密度和荧光斑面积大小来代表Cx40和Cx43的数量,从而达到对其进行准确定量分析目的。4、应用扫描电镜和超薄切片研究方法观察大鼠SAH后脑血管痉挛前后缝隙连接(GJ)的形态学特征。结果:1、实验过程中大鼠的死亡率18%左右,大多数死亡均发生在首次枕大池穿刺造模和二次枕大池穿刺注血造模时。成功建立大鼠可靠蛛网膜下腔出血(SA
5、H)后脑血管痉挛(CVS)动物模型,成功建模后的大鼠出现不同程度的肢体瘫痪、不能正常行走、精神萎靡、畏光、卷缩等表现。成功造模后颅内SAId血凝块大部分分布在基底池、环池、端脑表面沟回、鞍上池等处。大多数大鼠48小时后行二次经枕大池注血造模穿刺时即可见穿刺针头发现有血性脑脊液流出,这也间接说明SAH模型制造成功,成功率一般均≥92%上。2、利用脑血管浇铸法分别测定正常组和SAH3d、7d、14d组大鼠基底动脉摘要直径来证实脑血管痉挛(CVS)的发生;与正常组相比较,SAH3d、7d组大鼠基地动脉直径明显缩小、可见管壁不同程度增厚,而14d组中
6、大鼠脑基底动脉直径变化不明显更接近正常组。3、a、正常大鼠组中在脑基底动脉内皮、血管外膜和平滑肌层表达少见上主要以表达Cx43为主。b、当CVS后CVS大鼠脑基底动脉Cx43在平滑肌中表达明显增加。C、正常情况下Cx40主要存在于平滑肌层,但CVS后Cx40平滑肌中表达亦增加但不如Cx43增加明显。4、电镜下可见正常组中大鼠脑基底动脉血管呈典型的三层结构(外膜层、梭型平滑肌层和平滑的内膜层)排列整齐;大鼠基底动脉单层扁平状血管内皮细胞光滑,层次排列正常、管壁无增厚、余无异常改变。连续单层覆盖于内弹力上,细胞核呈锤状,细胞核膜边缘清晰;外膜细胞
7、核梭形、光滑。而在SAIl实验组大鼠基底动脉管壁检测到了阳性的病理性改变:SAH后第3、7和14天分别均可见血凝块附着,管壁内皮细胞变性、核固缩、细胞之间融合、部分甚至坏死、脱落、细胞间隙增宽;内弹力膜层增厚,线粒体变形,平滑肌细胞缺乏典型的梭形形态,弹力纤维层扭曲变形消失、细胞外膜增厚,以上各细胞之间以及细胞均发现有缝隙连接存在。本研究还发现无论正常组还是异常组血管外膜、内皮细胞之间和平滑肌细胞三层细胞之间都存在缝隙连接,但有意义的是SAH时这些缝隙连接通道的数量明显增加。结论:1、SAH后CVS的发生与脑血管的病理改变持续存在密切相关;2
8、、正常情况下Cx43主要分布在细胞内皮和血管外膜而Cx40主要在血管平滑肌层表达;3、蛛网膜下腔出血(SAll)后脑血管痉挛(CVS)时Cx43和Cx40表达都发生
此文档下载收益归作者所有